N6-metiladenosina (mA) es una modificación post-transcripcional ampliamente extendida en los ARNm eucariotas. Las proteínas con el dominio estructural YTH actúan como proteínas que se unen a mA al reconocer la modificación mA y regular el ARNm a través de este reconocimiento. En este estudio, se expresó un gen prototípico de proteína que se une a mA de la familia YTH en varios tejidos, y los análisis de localización subcelular indicaron que la proteína SlYTHDF2 se localizó en el núcleo y el citoplasma. Se obtuvieron líneas knockout utilizando la tecnología CRISPR/Cas9 y mostraron que las hojas senescentes acumulaban prematuramente ABA endógeno en comparación con el tipo salvaje. Además, encontramos que la oscuridad promovía la senescencia de las hojas en las líneas knockout y que el ABA exógeno aceleraba aún más la senescencia de las hojas en condiciones de oscuridad. El análisis de qRT-PCR reveló alteraciones significativas en la expresión de genes asociados con la vía del ABA. En comparación con el tipo salvaje, las plantas exhibieron niveles reducidos de pigmentos fotosintéticos, mayor acumulación de especies reactivas de oxígeno y un aumento del daño a las membranas celulares. Adicionalmente, descubrimos que SlYTHDF2 interactúa con la proteína de unión a cloroplastos SlRBCS3 a través de experimentos de dos híbridos en levadura y BiFC. En general, nuestros datos sugieren el papel importante de SlYTHDF2 en la regulación de la senescencia de las hojas de tomate.