Rápida tinción y destinción electroforética de geles de poliacrilamida
Autores: Motojima, Fumihiro
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2018
Acceso abierto
Artículo científico
2018
Rápida tinción y destinción electroforética de geles de poliacrilamida
Categoría
Ingeniería y Tecnología
Subcategoría
Bioingeniería
Palabras clave
Azul brillante de coomassie
Bandas de proteínas
Electroforesis en gel de poliacrilamida
Metanol
Unidad de transferencia semi-seca
Límite de detección
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 64
Citaciones: Sin citaciones
Los tintes azul brillante de Coomassie (CBB) han sido comúnmente utilizados para la tinción de bandas de proteínas en geles de electroforesis de poliacrilamida (PAGE). Sin embargo, la tinción y el destinte de los tintes CBB son demorados, y el uso de metanol es peligroso para la salud. Presento un método rápido de destinte electroforético utilizando una unidad de transferencia semi-seca y una fuente de alimentación de alta corriente. En este método, se utilizó etanol en lugar del peligroso metanol. La mayoría de las bandas de proteínas se hicieron visibles en 30 minutos. Después de un paso de destinte secundario, se destiñó por completo el CBB residual. El límite de detección para una proteína probada (5 ng) fue mayor que el del método convencional. Por lo tanto, este método es superior en cuanto a velocidad, seguridad, bajo costo y sensibilidad.
Descripción
Los tintes azul brillante de Coomassie (CBB) han sido comúnmente utilizados para la tinción de bandas de proteínas en geles de electroforesis de poliacrilamida (PAGE). Sin embargo, la tinción y el destinte de los tintes CBB son demorados, y el uso de metanol es peligroso para la salud. Presento un método rápido de destinte electroforético utilizando una unidad de transferencia semi-seca y una fuente de alimentación de alta corriente. En este método, se utilizó etanol en lugar del peligroso metanol. La mayoría de las bandas de proteínas se hicieron visibles en 30 minutos. Después de un paso de destinte secundario, se destiñó por completo el CBB residual. El límite de detección para una proteína probada (5 ng) fue mayor que el del método convencional. Por lo tanto, este método es superior en cuanto a velocidad, seguridad, bajo costo y sensibilidad.