Purificación y caracterización de la polifenol oxidasa en los frutos de
Autores: Demir, Dudu; Kabak, Selda; Çalayan, Kardelen
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2023
Acceso abierto
Artículo científico
2023
Purificación y caracterización de la polifenol oxidasa en los frutos de
Categoría
Ciencias Naturales y Subdisciplinas
Subcategoría
Biología
Palabras clave
Polifenol oxidasa
Purificación
SDS-PAGE
Parámetros cinéticos
PH óptimo
Temperatura óptima
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 15
Citaciones: Sin citaciones
En primer lugar, la polifenol oxidasa (PPO) fue purificada de los frutos utilizando cromatografía de afinidad con Sepharose 4B-L-tirosina-ácido aminobenzoico, y se caracterizó la enzima. La PPO fue purificada 20.59 veces. Posteriormente, se realizó un análisis de la PPO mediante electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecil sulfato sódico (SDS-PAGE). Se investigaron los parámetros cinéticos, los pHs óptimos y las temperaturas óptimas para tres sustratos. El pH óptimo y la temperatura óptima de la PPO fueron 9.0 y 20 grados C; 7.5 y 20 grados C; y 7.5 y 30 grados C, respectivamente, al utilizar pirrogalo, catecol y 4-metil catecol como sustratos. Para el pirrogalo, catecol y 4-metil catecol, los valores de , , y / se determinaron como 16.67 mM, 833.33 U/mLmin, y 50 U/mLminmM; 6.33 mM, 126.58 U/mLmin, y 20 U/mLminmM; y 5.38 mM, 107.53 U/mLmin, y 20 U/mLminmM, respectivamente. Como resultado, el pirrogalo fue un sustrato más apropiado que el catecol y el 4-metil catecol para la PPO de .
Descripción
En primer lugar, la polifenol oxidasa (PPO) fue purificada de los frutos utilizando cromatografía de afinidad con Sepharose 4B-L-tirosina-ácido aminobenzoico, y se caracterizó la enzima. La PPO fue purificada 20.59 veces. Posteriormente, se realizó un análisis de la PPO mediante electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecil sulfato sódico (SDS-PAGE). Se investigaron los parámetros cinéticos, los pHs óptimos y las temperaturas óptimas para tres sustratos. El pH óptimo y la temperatura óptima de la PPO fueron 9.0 y 20 grados C; 7.5 y 20 grados C; y 7.5 y 30 grados C, respectivamente, al utilizar pirrogalo, catecol y 4-metil catecol como sustratos. Para el pirrogalo, catecol y 4-metil catecol, los valores de , , y / se determinaron como 16.67 mM, 833.33 U/mLmin, y 50 U/mLminmM; 6.33 mM, 126.58 U/mLmin, y 20 U/mLminmM; y 5.38 mM, 107.53 U/mLmin, y 20 U/mLminmM, respectivamente. Como resultado, el pirrogalo fue un sustrato más apropiado que el catecol y el 4-metil catecol para la PPO de .