es un importante vector de patógenos, incluyendo los virus del Nilo Occidental y Usutu, que representa un riesgo significativo para la salud pública. La monitorización de la resistencia a piretroides en las poblaciones de mosquitos es esencial para un control efectivo del vector. Este estudio tiene como objetivo evaluar cuatro protocolos de extracción de ADN: QIAsymphony, reactivo directo DNAzol, Reagente de Preparación de Muestras PrepMan Ultra (USPR) y Chelex 100- para identificar un método óptimo para extraer ADN de individuos, como parte de una vigilancia de alta capacidad de resistencia a piretroides utilizando PCR de genotipado en tiempo real. El objetivo es la mutación L1014F en el gen del canal de sodio sensible al voltaje (VSSC), que confiere resistencia por knockdown (kdr) a los piretroides. Los mosquitos fueron recolectados en hábitats de invierno y verano en Lacio y Toscana, Italia, y el ADN fue extraído utilizando los cuatro métodos. La calidad, cantidad, tiempo de extracción y costo del ADN fueron comparados entre los diferentes métodos. El protocolo PrepMan USPR fue el más eficiente, proporcionando ADN de alta calidad con una relación de pureza 260/280 dentro del rango óptimo a un costo más bajo y en poco tiempo. Este método también demostró la tasa más alta de éxito de amplificación (77%) en los subsiguientes ensayos de PCR en tiempo real, convirtiéndolo en el protocolo preferido para estudios de genotipado a gran escala.