Un protocolo simple y rápido para el aislamiento de médula ósea murina adecuado para la diferenciación de células dendríticas
Autores: Song, Runqiu; Bafit, Mariam; Tullett, Kirsteen M.; Tan, Peck Szee; Lahoud, Mireille H.; O"Keeffe, Meredith; Purcell, Anthony W.; Braun, Asolina
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2024
Acceso abierto
Artículo científico
2024
Un protocolo simple y rápido para el aislamiento de médula ósea murina adecuado para la diferenciación de células dendríticas
Categoría
Ingeniería y Tecnología
Subcategoría
Bioingeniería
Palabras clave
Generación
Células dendríticas derivadas de médula ósea
Método de aislamiento
Centrifugación
CDC1s
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 23
Citaciones: Sin citaciones
La generación de células dendríticas derivadas de médula ósea es un enfoque ampliamente utilizado en la investigación inmunológica para estudiar el procesamiento y presentación de antígenos, así como las respuestas de activación de linfocitos T. Sin embargo, el paso inicial de aislar la médula ósea puede ser demorado, especialmente cuando se requieren mayores cantidades de células precursoras. Aquí, evaluamos si un método acelerado de aislamiento de médula ósea utilizando centrifugación es adecuado para la diferenciación de células dendríticas impulsadas por el ligando 3 de tirosina quinasa similar a FMS. En comparación con el método convencional de lavado, el método de aislamiento basado en centrifugación resultó en un rendimiento celular de médula ósea similar en el Día 0, aumentó el número de células para el Día 8, proporciones similares de subconjuntos de células dendríticas, y en consecuencia un mayor número de células dendríticas convencionales tipo 1 (cDC1) en el cultivo. Aunque el propósito principal de este método de optimización era mejorar la eficiencia experimental y aumentar la producción de cDC1, el protocolo también es compatible con la diferenciación de otros subconjuntos de células dendríticas como cDC2 y células dendríticas plasmacitoides, con un recuento celular de salida mejorado y un fenotipo consistente.
Descripción
La generación de células dendríticas derivadas de médula ósea es un enfoque ampliamente utilizado en la investigación inmunológica para estudiar el procesamiento y presentación de antígenos, así como las respuestas de activación de linfocitos T. Sin embargo, el paso inicial de aislar la médula ósea puede ser demorado, especialmente cuando se requieren mayores cantidades de células precursoras. Aquí, evaluamos si un método acelerado de aislamiento de médula ósea utilizando centrifugación es adecuado para la diferenciación de células dendríticas impulsadas por el ligando 3 de tirosina quinasa similar a FMS. En comparación con el método convencional de lavado, el método de aislamiento basado en centrifugación resultó en un rendimiento celular de médula ósea similar en el Día 0, aumentó el número de células para el Día 8, proporciones similares de subconjuntos de células dendríticas, y en consecuencia un mayor número de células dendríticas convencionales tipo 1 (cDC1) en el cultivo. Aunque el propósito principal de este método de optimización era mejorar la eficiencia experimental y aumentar la producción de cDC1, el protocolo también es compatible con la diferenciación de otros subconjuntos de células dendríticas como cDC2 y células dendríticas plasmacitoides, con un recuento celular de salida mejorado y un fenotipo consistente.