La extracción de ARN de alta calidad de las pieles de bayas de uva es un desafío debido a sus altos niveles de polisacáridos, compuestos fenólicos, azúcares y ácidos orgánicos, que pueden afectar negativamente la pureza y el rendimiento del ARN. De hecho, los polifenoles pueden unirse al ARN, los polisacáridos pueden co-precipitar, y los azúcares y ácidos orgánicos pueden interferir con las propiedades de pH e iónicas del tampón de extracción. Los kits comerciales ofrecen un método de extracción rápido, pero a menudo son ineficaces para las pieles de bayas de uva. De manera similar, los protocolos que funcionan bien para otros tejidos vegetales también son ineficaces y requieren mucho tiempo para este tejido. Para superar estas limitaciones, optimizamos la aislamiento de ARN añadiendo un paso de pre-lavado con sorbitol tanto a un protocolo no comercial como a un kit comercial. Nuestros resultados muestran que mejora significativamente el rendimiento y la calidad del ARN de las pieles de bayas de uva, aumentando la pureza e integridad del ARN, como lo evidencian los valores más altos de RIN (Número de Integridad del ARN) y mejores mediciones de Qubit y Nanodrop. La eficacia de la estrategia se validó aún más a través de la secuenciación de ARN, obteniendo lecturas de alta calidad con bajas tasas de error, adecuadas para estudios de expresión génica. Así, la incorporación de un paso de pre-lavado con sorbitol mejora el rendimiento y la calidad del ARN de las pieles de bayas de uva, haciéndolo adecuado para la secuenciación de alto rendimiento, y proporciona una herramienta confiable para avanzar en la investigación de la vid.