La contaminación por diésel de los suelos agrícolas es una gran preocupación porque los hidrocarburos son tóxicos para todas las formas de vida y pueden entrar potencialmente en la cadena alimentaria a través de cultivos o plantas utilizadas para la remediación. Los datos sobre la capacidad de las plantas para absorber, translocar y acumular compuestos derivados del diésel son controvertidos no solo debido a la probable diversidad de actitudes de las especies vegetales, sino también por la falta de un método fiable para distinguir los compuestos petrogénicos de los biogénicos en los tejidos vegetales. El propósito de este estudio fue establecer un protocolo basado en GC-MS que permita la determinación de hidrocarburos derivados del diésel en plantas cultivadas en suelos contaminados para evaluar los riesgos humanos y ecológicos, predecir la efectividad de la fitoremediación y la eliminación de biomasa. Para ello, se utilizaron dos especies de plantas, L. y L., pertenecientes a dos familias de plantas vasculares diversas, como modelos vegetales. Se cultivaron en suelos contaminados con concentraciones crecientes de combustible diésel, y la biomasa producida se utilizó para establecer la extracción de hidrocarburos y el análisis de GC-MSD. El protocolo desarrollado también se aplicó al análisis de plantas de L., que pertenecen a una familia botánica diferente y se cultivaron en un suelo natural altamente contaminado durante mucho tiempo. Los resultados mostraron la posibilidad de distinguir compuestos derivados del diésel de los hidrocarburos biogénicos en la mayoría de las plantas vasculares terrestres, considerando solo los compuestos totales de diésel en el rango de carbono de n-alcanos C10-C26, donde la interferencia de los compuestos biogénicos es negligible. La cuantificación de hidrocarburos diésel en los tejidos vegetales estuvo fuertemente correlacionada (0.92 < r < 0.99) con la concentración de diésel en suelos contaminados, lo que sugiere una capacidad general de las especies vegetales consideradas para adsorber y translocar cantidades relativamente bajas de hidrocarburos diésel y la fiabilidad del protocolo desarrollado.