Desarrollo de un protocolo de detección rápido, preciso y en el sitio para las hormigas de fuego rojas importadas, (Hymenoptera: Formicidae)
Autores: Kim, A-Young; Koh, Young Ho
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2022
Acceso abierto
Artículo científico
2022
Desarrollo de un protocolo de detección rápido, preciso y en el sitio para las hormigas de fuego rojas importadas, (Hymenoptera: Formicidae)
Categoría
Ingeniería y Tecnología
Subcategoría
Bioingeniería
Palabras clave
Protocolo de diagnóstico molecular rápido para hormigas de fuego
Ensayos LAMP
ADN genómico
Detección en el lugar
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 24
Citaciones: Sin citaciones
Un protocolo de diagnóstico molecular rápido, preciso y en el lugar para las hormigas de fuego importadas rojas fue desarrollado utilizando ensayos de amplificación isotérmica mediada por bucle (LAMP). Se confirmó que 11977 (número de acceso de GenBank MK986826) era un gen específico para las hormigas de fuego importadas rojas. Los ensayos 4p-LAMP y 6p-LAMP de cuatro y seis cebadores, respectivamente, detectaron específicamente a las hormigas de fuego importadas rojas. El tiempo de reacción de los ensayos 6p-LAMP se redujo en 5 minutos en comparación con los ensayos 4p-LAMP. La cantidad óptima de polimerasa y el límite de detección para los ensayos 6p-LAMP fueron de 0.1 unidad/L y 5 fg/L, respectivamente. Además, se describió un método para extraer ADN genómico de tejidos de hormigas en 2 a 3 minutos y un protocolo para realizar ensayos LAMP en el lugar utilizando una taza de calentamiento de automóvil y una caja de observación LAMP. El protocolo de detección en el lugar utilizado en este estudio fue posible en un plazo de 30 minutos desde la extracción de ADN hasta la identificación de la especie.
Descripción
Un protocolo de diagnóstico molecular rápido, preciso y en el lugar para las hormigas de fuego importadas rojas fue desarrollado utilizando ensayos de amplificación isotérmica mediada por bucle (LAMP). Se confirmó que 11977 (número de acceso de GenBank MK986826) era un gen específico para las hormigas de fuego importadas rojas. Los ensayos 4p-LAMP y 6p-LAMP de cuatro y seis cebadores, respectivamente, detectaron específicamente a las hormigas de fuego importadas rojas. El tiempo de reacción de los ensayos 6p-LAMP se redujo en 5 minutos en comparación con los ensayos 4p-LAMP. La cantidad óptima de polimerasa y el límite de detección para los ensayos 6p-LAMP fueron de 0.1 unidad/L y 5 fg/L, respectivamente. Además, se describió un método para extraer ADN genómico de tejidos de hormigas en 2 a 3 minutos y un protocolo para realizar ensayos LAMP en el lugar utilizando una taza de calentamiento de automóvil y una caja de observación LAMP. El protocolo de detección en el lugar utilizado en este estudio fue posible en un plazo de 30 minutos desde la extracción de ADN hasta la identificación de la especie.