Las proteínas de unión a odorantes (OBPs) son proteínas solubles abundantes secretadas en el moco nasal de una variedad de especies que se cree que están involucradas en el transporte de odorantes hacia los receptores olfativos. En este estudio, informamos sobre la caracterización funcional de la OBP5 de ratón (mOBP5). La mOBP5 se expresó recombinantemente como una proteína etiquetada con hexahistidina en bacterias y se purificó utilizando cromatografía de afinidad por metales. El estado oligomérico y la composición de la estructura secundaria de la mOBP5 se investigaron utilizando filtración en gel y espectroscopía de dicromatismo circular. Experimentos de fluorescencia revelaron que la mOBP5 interactúa con la sonda fluorescente -fenil naftilamina (NPN) con afinidad micromolar. Experimentos de unión competitiva con 40 odorantes indicaron que la mOBP5 se une a un número restringido de odorantes con buena afinidad. La calorimetría de titulación isoterma (ITC) confirmó que la mOBP5 se une a estos compuestos con constantes de asociación en el rango micromolar bajo. Finalmente, el modelado por homología de proteínas y el análisis de acoplamiento molecular indicaron los residuos de aminoácidos de la mOBP5 que determinan sus propiedades de unión.