El propósito de esta investigación fue determinar las propiedades de los ácidos húmicos aislados de muestras de suelo tomadas de un experimento estático de 40 años: los factores experimentales fueron la fertilización con estiércol (30 t ha; FYM) y nitrógeno a tasas de 40, 60 y 120 t ha. De las muestras de suelo, se extrajeron ácidos húmicos (HAs) y se determinaron lo siguiente: composición elemental, propiedades hidrofílicas e hidrofóbicas y propiedades espectrométricas en el rango UV-VIS e IR. Los HAs del suelo fertilizado con estiércol y N en comparación con los HAs del suelo fertilizado con N (sin estiércol) se caracterizaron por un mayor grado de alifaticidad y, en consecuencia, una mayor proporción de fracciones hidrofílicas y valores más bajos de oxidación interna. Según los parámetros espectrométricos, se indicó que las partículas de HA del suelo fertilizado con estiércol se caracterizan por una mayor proporción de fragmentos de lignina no descompuestos, un menor grado de humificación y, al mismo tiempo, una mayor susceptibilidad a la oxidación. Las relaciones obtenidas mostraron que la aromaticidad y la hidrofobicidad de las moléculas de HA del suelo fertilizado con estiércol pueden aumentarse en ciertas dosis de N (60 y 120 t ha), lo cual es particularmente importante en términos del papel que desempeñan las sustancias húmicas en la secuestración de carbono.