Propamocarb es un pesticida ampliamente utilizado para controlar el mildiú velloso del pepino. El uso excesivo de propamocarb ha dado lugar a residuos y fitotoxicidad. Sin embargo, el proceso de desintoxicación y metabolismo de propamocarb no ha sido bien documentado. Nuestro trabajo previo mostró diferencias en los residuos de propamocarb entre los diferentes genotipos de pepino y su regulación por múltiples genes. Basándonos en los datos ya reportados sobre perfiles de expresión génica bajo tratamiento con propamocarb, identificamos la vía del glutatión, que incluye seis genes diferentes (, , , , , y ), involucrados en la desintoxicación de propamocarb. El análisis de qPCR mostró que () fue el más significativamente y diferencialmente expresado a las 48 h después de la pulverización de propamocarb en las variedades de pepino Y3F604 (bajos residuos de propamocarb) y M729 (altos residuos de propamocarb). En Y3F604, la expresión aumentó de 6 a 48 h después de la pulverización de propamocarb, y la expresión se correlacionó positivamente con los residuos de propamocarb, mientras que M729 no mostró diferencias significativas en la expresión. Por lo tanto, presumimos como un gen clave en el manejo de los residuos de propamocarb. El análisis funcional de genes mostró que los residuos de propamocarb disminuyeron en plantas sobreexpresadas y aumentaron en plantas antisentido. La sobreexpresión aumentó la acumulación de glutatión (GSH) y las actividades de glutatión S-transferasa (GST), glutatión reductasa (GR) y glutatión peroxidasa (GPX), probablemente para la desintoxicación de propamocarb. La actividad de enzimas antioxidantes (SOD, POD, CAT y APX) aumentó para mantener una alta capacidad antioxidante en plantas sobreexpresadas. Los niveles de superóxido (O), peróxido de hidrógeno (HO) y malondialdehído (MDA) disminuyeron en plantas sobreexpresadas, promoviendo el sistema antioxidante compuesto por ácido ascórbico y glutatión (AsA-GSH). Por lo tanto, concluimos que alivia los residuos y la fitotoxicidad de propamocarb al potenciar el potencial antioxidante y de desintoxicación de glutatión del pepino.