Aumentar el rendimiento de los cultivos con suministros bajos de N se ha convertido en uno de los principales objetivos de la agricultura actual para reducir el uso excesivo de fertilizantes químicos. Una estrategia sostenible para mejorar la productividad de los cultivos, la asimilación de N y la Eficiencia de Uso de N (NUE) en condiciones de crecimiento limitado de N es la aplicación de bioestimulantes, como las sustancias húmicas (HS). Aquí, evaluamos la efectividad de un bioestimulante a base de HS, BLACKJAK, en mejorar el crecimiento de la lechuga y la NUE en condiciones de déficit de N. Por lo tanto, BLACKJAK se aplicó radicalmente (R) y foliarmente (F) en las siguientes dosis: R-HS 0.40 mL/L, R-HS 0.60 mL/L, F-HS 7.50 mL/L y F-HS 10.00 mL/L. Se aplicaron tres niveles de N: óptimo (7 mM) y déficit de N (3 mM y 1 mM). Los resultados mostraron que el peso seco del brote (DW) se redujo a 3 mM de N (-32%) y 1 mM de N (-42%). Sin embargo, BLACKJAK mejoró el crecimiento de las plantas en los tres niveles de N, especialmente con F-HS a 10.00 mL/L, que mostró un aumento del 43% en el peso seco del brote a 3 y 1 mM de N, en comparación con las plantas no tratadas con HS. BLACKJAK también mejoró la fotosíntesis, la acumulación de N orgánico y NO, la actividad de las enzimas de asimilación de N y la concentración de aminoácidos y proteínas, independientemente del nivel de N. Además, las HS mejoraron los parámetros de NUE en todas las condiciones de N, excepto para R-HS 0.60 mL/L a 1 mM de N. Por lo tanto, nuestro estudio sugiere que el producto a base de HS BLACKJAK podría ser un buen candidato para reducir el uso de fertilizantes químicos y mejorar el crecimiento de la lechuga y la NUE en condiciones de bajo N, aunque se requiere más investigación.