La gino génesis ofrece una ruta prometedora para la producción de haploides duplicados (DH), sin embargo, los protocolos eficientes siguen siendo escasos. Este estudio estableció un sistema de cultivo de ovarios reproducible y evaluó el ribosido de zeatina (ZR) como una citoquinina alternativa. Los ovarios recolectados en antésis y un día antes fueron cultivados para evaluar nueve medios con diferentes combinaciones de citoquinina-auxina. Posteriormente, se evaluaron cuatro formulaciones optimizadas a base de ZR. Ambas etapas florales mostraron actividad morfogenética, pero la formación de embriones ocurrió casi exclusivamente en ovarios pre-antésis. Entre los tratamientos con ZR, E6.1 (1 mg·L ZR + 3 mg·L NAA, 30 g·L de sacarosa) logró la mayor producción embrionaria (aproximadamente 97 embriones por 100 explantes), mientras que los medios de alta sacarosa (120 g·L) indujeron abundantes óvulos hinchados pero una conversión deficiente, lo que sugiere que un exceso de presión osmótica promueve la morfogénesis pero obstaculiza la transición embrionaria. En total, se obtuvieron 415 embriones y 52 regenerantes fueron analizados por citometría de flujo, confirmando plantas haploides, diploides y mixoploides y evidenciando la duplicación espontánea de cromosomas durante el desarrollo in vitro. Un sistema de puntuación categórica A-D permitió la predicción temprana del potencial embrionario. Esto representa la primera aplicación exitosa de ZR en la gino génesis de cucurbitáceas y destaca su valor como una citoquinina biológicamente compatible para la producción de DH. Los hallazgos abren nuevas avenidas para probar formulaciones a base de ZR en otras especies bajo diferentes regímenes de auxina y sacarosa.