La generación de cerdos genéticamente modificados tiene un impacto importante gracias a sus aplicaciones en la investigación básica, la biomedicina y la producción de carne. La clonación fue la primera técnica utilizada para esta producción, aunque se desarrollaron métodos más fáciles y económicos, como la microinyección, la electroporación o la lipofección de ovocitos y cigotos. En este estudio, analizamos la producción de embriones genéticamente modificados a través de la lipofección de ovocitos intactos de zona pelúcida utilizando Lipofectamine CRISPRMAX Cas9 en comparación con el método de electroporación. Se evaluaron dos factores: (i) el incremento en la concentración de los complejos de ribonucleoproteína-lipofectamina (LRNPC) (5% vs. 10%) y (ii) la concentración de ribonucleoproteína dentro de los complejos (1xRNP vs. 2xRNP). Encontramos que el incremento en la concentración de los LRNPC tuvo un efecto perjudicial en el desarrollo del embrión y un efecto posterior en el número de embriones mutantes. El grupo del 5% tuvo una tasa de blastocistos mutantes similar al método de electroporación (5.52% y 6.38%, respectivamente, > 0.05). El incremento en la concentración de la ribonucleoproteína dentro de los complejos no tuvo efecto en la tasa de blastocistos ni en la tasa de mutación, siendo la tasa de blastocistos mutantes similar en ambos grupos de lipofección 1xRNP y 2xRNP y en el grupo de electroporación (1.75%, 3.60% y 3.57%, respectivamente, > 0.05). Aquí, mostramos que es posible producir embriones knock-out a través de la lipofección de ovocitos porcinos intactos de zona pelúcida con eficiencias similares a las de la electroporación, aunque se necesita más optimización, principalmente en términos del uso de vesículas más eficientes para la encapsulación con diferentes composiciones.