En el presente trabajo se estudió a L. como un sistema adecuado de cultivo in vitro de raíces adventicias para la producción de importantes moléculas bioactivas, como el ácido rosmarínico (AR). Se inició un cultivo de callo a partir de explantes de hoja, pecíolo y raíz en medio sólido MS suplementado con 5 M de NAA + 5 M de kinetina (ODK3) o 5 M de NAA + 0.5 M de kinetina (ODK4). Nuevas raíces formadas a partir de callos de hoja, pecíolo y raíz fueron transferidas asépticamente a matraces Erlenmeyer que contenían 100 mL de medio líquido y se agitaron a 120 rpm en la oscuridad. El medio líquido utilizado fue el MS suplementado con 35 M de IBA + 2.5 M de kinetina (ODY1) o 5 M de NAA + 0.5 M de kinetina (ODY2). Se registraron parámetros de producción de biomasa, contenido de AR (%) e índice de rendimiento (IR) para cada tipo de explante, composición del medio y período de incubación. Los resultados mostraron, en todos los casos, la producción de AR in vitro. Entre los dos medios líquidos (ODY1, ODY2) y los diferentes períodos de cultivo, el medio ODY1 y el período de cultivo más largo de 200 días fueron más efectivos para la producción de AR y biomasa, independientemente del tipo de explante inicial utilizado. La combinación de ODK4-ODY1 resultó en un mayor AR (5.1% y 4.7%), producción de biomasa fresca (19.0 g y 11.6 g), IR medio (93.7 mg y 51.4 mg) e IR por explante (3.75 mg y 2.06 mg) para raíces derivadas de callos de hoja y callos de raíz, respectivamente. Sin embargo, el tratamiento de transición sólido ODK3 (200 días)-líquido ODY1 (40 días) fue más beneficioso para raíces derivadas de callos de pecíolo, lo que llevó a un aumento de 18.8 veces en la tasa de crecimiento de biomasa fresca. La acumulación de AR y los IR también fueron significativamente influenciados por el tipo de explante, con el valor más alto producido a partir de callos de pecíolo de raíz (6.6% de AR en peso seco, 115.3 mg de IR medio y 4.61 mg de IR por explante) después de 240 días.