El Ibis Crestado ha fascinado durante mucho tiempo a los ornitólogos con su enigmático cambio de color en el plumaje. Después de más de un siglo de curiosidad, el misterio fue finalmente desvelado en la década de 1970, revelando el mecanismo detrás de esta notable transformación. A diferencia de otras especies de aves, el Ibis Crestado logra la coloración de su plumaje nupcial a través de un comportamiento único de embadurnamiento. Después de un baño de agua, aplica una sustancia negra pegajosa secretada por un parche de piel en la región del cuello y la garganta. Sin embargo, los componentes químicos de esta sustancia negra no se han estudiado en detalle hasta ahora. Para abordar este problema, realizamos un estudio para detectar los componentes de la sustancia negra y explorar la relación entre los niveles de hormonas sexuales y la secreción de la sustancia negra. Utilizamos un ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA) para medir los cambios mensuales en los niveles de hormonas esteroides (estradiol E2, testosterona T y progesterona PROG) en heces. También analizamos la correlación entre los niveles de hormonas sexuales y el comportamiento de embadurnamiento. Los resultados mostraron que los niveles de hormonas sexuales están estrechamente relacionados con la secreción y aplicación de la sustancia negra. Además, analizamos cualitativamente los componentes químicos de la sustancia negra utilizando cromatografía de gases-espectrometría de masas (GC-MS), descubriendo la presencia de 117 componentes químicos distintos. Suponemos que la coloración negra resulta de la polimerización de constituyentes químicos seleccionados entre estos componentes. Estos hallazgos proporcionan una base para una mayor exploración sobre la importancia biológica de la sustancia negra. En general, nuestro estudio detectó componentes en la sustancia negra y estudió cómo los niveles de hormonas sexuales se relacionan con su secreción. Comprender los efectos de las hormonas en la coloración ayuda en la gestión precisa del hábitat, como la preservación de humedales, crucial para la supervivencia del Ibis Crestado. Implementar medidas que aumenten las hormonas durante las temporadas de reproducción mejora la reproducción y la salud, vitales para su conservación.