Este artículo se centra en los diferentes métodos de evaluación del cortisol, destacando el uso creciente de métodos no invasivos para la evaluación del cortisol. Después de revisar más de 18,000 estudios, se identificaron 78 relevantes, lo que muestra claramente un cambio hacia métodos menos perjudiciales. El comité de ética recomienda que los métodos de investigación sean lo más no invasivos posible, enfatizando la importancia de minimizar el malestar para los animales de investigación. Los métodos invasivos pueden comprometer el bienestar de los animales e influir en los parámetros fisiológicos. El empleo de métodos no invasivos de muestreo podría mejorar la fiabilidad de los resultados al evitar efectos confusos relacionados con los cambios hormonales inducidos por el estrés. Muchos factores, incluidos los ambientales, genéticos y sociales, influyen en los niveles de cortisol. Desafíos como los tamaños de muestra pequeños y los protocolos inconsistentes siguen siendo una gran preocupación. Este estudio hace un llamado a la investigación interdisciplinaria que combine medidas conductuales y fisiológicas, lo que ayudará a refinar las diferentes técnicas de medición del cortisol. Los hallazgos futuros pueden mejorar las principales preocupaciones sobre el bienestar de los caninos y garantizar prácticas de investigación éticas.