Criopreservación de ciruelas indígenas y monitoreo de la capacidad de multiplicación y enraizamiento de brotes obtenidos de especímenes criopreservados
Autores: Vujovi, Tatjana; Aneli, Tatjana; Vasilijevi, Bojana; Jevremovi, Darko; Engelmann, Florent
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2023
Acceso abierto
Artículo científico
2023
Criopreservación de ciruelas indígenas y monitoreo de la capacidad de multiplicación y enraizamiento de brotes obtenidos de especímenes criopreservados
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Subcategoría
Botánica
Palabras clave
Estudio
Crioplaca
Vitrificación
Deshidratación
Crioconservación
Regeneración
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 10
Citaciones: Sin citaciones
El objetivo de este estudio es evaluar la idoneidad de los métodos de criopreservación por vitrificación (V cryo-plate) y deshidratación (D cryo-plate) para la conservación a largo plazo de ocho genotipos autóctonos de L. originarios de la región de la Península Balcánica. Las yemas de brote in vitro se pre-cultivaron brevemente durante 1 día a 23 grados C en la oscuridad en un medio que contenía 0.3 M de sacarosa y luego se incrustaron en gel de alginato de calcio dentro de los pocillos de las crioplacas de aluminio. En el protocolo de V cryo-plate, la deshidratación se llevó a cabo a temperatura ambiente utilizando las siguientes soluciones de vitrificación: solución de vitrificación de planta original 2 (PVS2) y solución PVS2 al 90% (durante 20 y 40 min) y solución de vitrificación de planta 3 (PVS3) (durante 60 y 80 min). En el protocolo de D cryo-plate, la deshidratación se realizó durante 2, 2.5 o 3 h sobre gel de sílice a 23 grados C. El efecto de los diferentes tratamientos se evaluó mediante el monitoreo del rebrote de explantes tanto no congelados como criopreservados. Después de la criopreservación, cinco genotipos lograron tasas de rebrote superiores al 40% en al menos uno de los protocolos aplicados, mientras que dos genotipos mostraron tasas de rebrote de alrededor del 10%. Se logró una mejora significativa en el éxito del rebrote para todos los genotipos utilizando ambos métodos de crioplate al pre-cultivar las yemas de brote durante 7 días en un medio que contenía 0.5 M de sacarosa en completa oscuridad a 4 grados C. Los brotes regenerados de explantes criopreservados se monitorearon adicionalmente in vitro. Para el tercer subcultivo, no solo habían recuperado, sino que incluso habían superado la capacidad de multiplicación (índice de multiplicación, longitud de brotes axiales y laterales) de los brotes regenerados de controles de disección. Tras la multiplicación, los brotes criopreservados se enraizaron con éxito y se evaluó la capacidad de enraizamiento mediante el monitoreo del porcentaje de enraizamiento, número y longitud de raíces, y altura de plántulas enraizadas.
Descripción
El objetivo de este estudio es evaluar la idoneidad de los métodos de criopreservación por vitrificación (V cryo-plate) y deshidratación (D cryo-plate) para la conservación a largo plazo de ocho genotipos autóctonos de L. originarios de la región de la Península Balcánica. Las yemas de brote in vitro se pre-cultivaron brevemente durante 1 día a 23 grados C en la oscuridad en un medio que contenía 0.3 M de sacarosa y luego se incrustaron en gel de alginato de calcio dentro de los pocillos de las crioplacas de aluminio. En el protocolo de V cryo-plate, la deshidratación se llevó a cabo a temperatura ambiente utilizando las siguientes soluciones de vitrificación: solución de vitrificación de planta original 2 (PVS2) y solución PVS2 al 90% (durante 20 y 40 min) y solución de vitrificación de planta 3 (PVS3) (durante 60 y 80 min). En el protocolo de D cryo-plate, la deshidratación se realizó durante 2, 2.5 o 3 h sobre gel de sílice a 23 grados C. El efecto de los diferentes tratamientos se evaluó mediante el monitoreo del rebrote de explantes tanto no congelados como criopreservados. Después de la criopreservación, cinco genotipos lograron tasas de rebrote superiores al 40% en al menos uno de los protocolos aplicados, mientras que dos genotipos mostraron tasas de rebrote de alrededor del 10%. Se logró una mejora significativa en el éxito del rebrote para todos los genotipos utilizando ambos métodos de crioplate al pre-cultivar las yemas de brote durante 7 días en un medio que contenía 0.5 M de sacarosa en completa oscuridad a 4 grados C. Los brotes regenerados de explantes criopreservados se monitorearon adicionalmente in vitro. Para el tercer subcultivo, no solo habían recuperado, sino que incluso habían superado la capacidad de multiplicación (índice de multiplicación, longitud de brotes axiales y laterales) de los brotes regenerados de controles de disección. Tras la multiplicación, los brotes criopreservados se enraizaron con éxito y se evaluó la capacidad de enraizamiento mediante el monitoreo del porcentaje de enraizamiento, número y longitud de raíces, y altura de plántulas enraizadas.