Las células estromales mesenquimatosas (CEM) se han utilizado durante mucho tiempo en la investigación para la regeneración ósea, con evidencia de sus propiedades beneficiosas. En el área segmentaria de las terapias basadas en CEM, los vesículos extracelulares (VE) derivados de CEM también han mostrado grandes efectos terapéuticos en varias enfermedades, incluida la curación ósea. Este estudio tuvo como objetivo evaluar si el acondicionamiento de las CEM mejora los efectos terapéuticos de sus vesículos extracelulares derivados para la regeneración ósea. Se realizó una investigación electrónica hasta febrero de 2021 para recuperar los estudios en las siguientes bases de datos: PubMed, Scopus y Web of Science. Los estudios fueron seleccionados según los criterios de inclusión. Se extrajo información relevante, incluidos experimentos in vitro e in vivo, y los estudios en animales fueron evaluados por riesgo de sesgo mediante la herramienta SYRCLE. Se recuperaron un total de 463 estudios, y 18 estudios cumplieron con los criterios de inclusión (10 estudios para su análisis in vitro y 8 estudios para su análisis in vitro e in vivo). Los métodos de acondicionamiento reportados incluyeron: medio osteogénico; dimetiloxalilglicina; dexametasona; silicato de calcio sustituido por estroncio; hipoxia; microambiente mecánico 3D; y la sobreexpresión de miR-375, proteína morfogenética ósea-2 y factor-1alfa inducible por hipoxia mutante. Los métodos de acondicionamiento de las CEM en los estudios reportados generan exosomas capaces de promover significativamente la regeneración ósea. Sin embargo, se observó heterogeneidad respecto a la fuente celular, el método de acondicionamiento, la aislamiento y concentración de VE, y el modelo de defecto entre los estudios. Los diferentes métodos de acondicionamiento reportados en esta revisión mejoran los efectos terapéuticos de los VE derivados de CEM para la regeneración ósea, pero aún necesitan ser abordados en modelos animales más grandes para una mayor aplicación clínica.