La búsqueda de polimorfismos de ADN útiles para la mejora genética de los animales de granja lecheros ha abarcado más de 40 años, arrojando hallazgos relevantes en el ganado vacuno para características de leche, donde se ha encontrado la mejor combinación de alelos para el procesamiento lácteo en los genes de caseína y en . Hoy en día, no se han alcanzado resultados similares en búfalos de río, a pesar de la disponibilidad de tecnologías genómicas avanzadas y registros fenotípicos precisos. El objetivo del presente estudio fue investigar y validar el efecto de cuatro polimorfismos de un solo nucleótido (SNP) en los genes , , y sobre siete características de la leche en una población más grande de búfalos. Estos SNPs se han reportado previamente como asociados con, o que afectan, características lecheras en poblaciones más pequeñas que a menudo pertenecen a una sola granja. Se genotiparon un total de 800 búfalos. Las siguientes características se registraron individualmente, mensualmente, durante cada período completo de lactancia desde 2010 hasta 2021: producción diaria de leche (dMY, kg), producción de proteína (dPY, kg) y producción de grasa (dFY, kg), contenidos de grasa y proteína (dFP, % y dPP, %), recuento de células somáticas (SCC, 10 células/mL) y urea (mg/dL). Se disponía de un total de 15,742 registros individuales de pruebas de leche (2496 lactancias) para 680 vacas búfalas, con 3.6 +/- 1.7 partos (de 1 a 13) y un promedio de 6.1 +/- 1.2 registros de prueba por lactancia. Tres de cuatro SNPs en los genes , y estaban asociados con al menos una de las características analizadas. En particular, el (AJ005430:c.578C>T) mostró asociaciones favorables con todas las características de producción (dMY, = 0.022; dPY, = 0.014; dFY, = 0.029) y el puntaje de células somáticas (SCS, = 0.032). El (HQ677596: c.536C>T) estuvo positivamente asociado con SCS ( = 0.005) y urea en leche ( = 0.04). Se observaron efectos favorables sobre la producción diaria de leche (dMY, = 0.028), porcentajes de grasa (dFP, = 0.027) y proteína (dPP, = 0.050) para el . Por el contrario, el no mostró ninguna asociación con las características de la leche. Este es el primer ejemplo de un estudio de confirmación realizado en el búfalo de río mediterráneo para genes de interés económico en el campo lácteo, y representa una indicación muy importante para la preselección de jóvenes toros destinados a programas de cría orientados a una producción láctea más sostenible.