El valor nutricional de la leche de oveja y sus derivados está influenciado por la fracción lipídica, que se ve afectada por la dieta y la genética. Este estudio tuvo como objetivo explorar las variaciones genéticas en los genes y evaluar el impacto del genotipo en la calidad de la leche en ovejas del Valle del Belìce, considerando la suplementación de la dieta con pulpa de algarrobo y grano de cebada. Entre los sitios potencialmente polimórficos, solo g.127 C > A y g.87 C > A mostraron variabilidad. El genotipo no impactó significativamente en el rendimiento y la composición de la leche, excepto por un mayor contenido de urea en los genotipos CA que en los CC. La pulpa de algarrobo aumentó el contenido de grasa en la leche en comparación con el grano de cebada. La variación genética en se asoció con cambios en el perfil de ácidos grasos de la leche; específicamente, el genotipo CA exhibió niveles más altos de ácidos grasos de cadena corta y niveles más bajos de ácidos grasos poliinsaturados en comparación con el genotipo CC. La suplementación con pulpa de algarrobo aumentó los ácidos grasos saturados y redujo las fracciones insaturadas, lo que llevó a una leche con índices aterogénicos y trombogénicos más altos. No se encontró una interacción significativa entre el genotipo y la dieta. Este estudio proporciona información sobre los factores genéticos y dietéticos que influyen en la composición de la leche de oveja. Se necesita más investigación para comprender el impacto de estas variaciones genéticas en la producción y composición de la leche, así como para determinar los niveles óptimos de pulpa de algarrobo para mejorar el porcentaje de grasa y promover prácticas de cría sostenible de ovejas.