Una plataforma de patch clamp controlada por temperatura demostrada en linfocitos T Jurkat y neuronas derivadas de células madre pluripotentes inducidas humanas
Autores: Harberts, Jann; Kusch, Max; O"Sullivan, John; Zierold, Robert; Blick, Robert H.
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2020
Acceso abierto
Artículo científico
2020
Una plataforma de patch clamp controlada por temperatura demostrada en linfocitos T Jurkat y neuronas derivadas de células madre pluripotentes inducidas humanas
Categoría
Ingeniería y Tecnología
Subcategoría
Bioingeniería
Palabras clave
Estudios electrofisiológicos
Control de temperatura
Estudios electrofisiológicos
Procesos dependientes de la temperatura
Condiciones fisiológicas
Alteraciones de temperatura
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 32
Citaciones: Sin citaciones
A pesar de que el patch clamping a temperatura ambiente es un procedimiento estándar ampliamente difundido en la comunidad electrofisiológica, no representa el sistema biológico en mamíferos a alrededor de 37 grados Celsius. Para imitar mejor el entorno natural en estudios electrofisiológicos, presentamos una plataforma de patch clamp controlada por temperatura, construida a medida para microscopios verticales, que puede adaptarse fácilmente a cualquier configuración de patch clamp vertical, ya sea comercialmente disponible o casera. Nuestro sistema puede enfriar y calentar la plataforma con solo pequeñas variaciones de temperatura de menos de 0.5 grados Celsius. Demostramos nuestro sistema con mediciones de patch clamp a 36 grados Celsius en linfocitos T Jurkat y neuronas derivadas de células madre pluripotentes inducidas humanas. Los parámetros de la membrana pasiva y las propiedades electrofisiológicas características, como las propiedades de activación de los canales iónicos dependientes de voltaje y la generación de potenciales de acción, se comparan con mediciones a temperatura ambiente. Observamos que muchos procesos que no se consideran explícitamente dependientes de la temperatura muestran cambios con la temperatura. Por lo tanto, creemos en la necesidad de un control de temperatura en las mediciones de patch clamp si se requieren condiciones fisiológicas mejoradas. Además, aconsejamos a los investigadores comparar solo resultados electrofisiológicos directamente que hayan sido medidos a temperaturas similares, ya que pequeñas variaciones en las propiedades celulares podrían ser causadas por alteraciones de temperatura.
Descripción
A pesar de que el patch clamping a temperatura ambiente es un procedimiento estándar ampliamente difundido en la comunidad electrofisiológica, no representa el sistema biológico en mamíferos a alrededor de 37 grados Celsius. Para imitar mejor el entorno natural en estudios electrofisiológicos, presentamos una plataforma de patch clamp controlada por temperatura, construida a medida para microscopios verticales, que puede adaptarse fácilmente a cualquier configuración de patch clamp vertical, ya sea comercialmente disponible o casera. Nuestro sistema puede enfriar y calentar la plataforma con solo pequeñas variaciones de temperatura de menos de 0.5 grados Celsius. Demostramos nuestro sistema con mediciones de patch clamp a 36 grados Celsius en linfocitos T Jurkat y neuronas derivadas de células madre pluripotentes inducidas humanas. Los parámetros de la membrana pasiva y las propiedades electrofisiológicas características, como las propiedades de activación de los canales iónicos dependientes de voltaje y la generación de potenciales de acción, se comparan con mediciones a temperatura ambiente. Observamos que muchos procesos que no se consideran explícitamente dependientes de la temperatura muestran cambios con la temperatura. Por lo tanto, creemos en la necesidad de un control de temperatura en las mediciones de patch clamp si se requieren condiciones fisiológicas mejoradas. Además, aconsejamos a los investigadores comparar solo resultados electrofisiológicos directamente que hayan sido medidos a temperaturas similares, ya que pequeñas variaciones en las propiedades celulares podrían ser causadas por alteraciones de temperatura.