El alto valor de la trufa negra recompensa el lento crecimiento del hongo cuando se establece en el campo. Agregar un cultivo secundario, como plantas medicinales y aromáticas (MAP), podría mejorar aún más la sostenibilidad de los sistemas agroforestales de producción de trufas. Se establecieron cultivos duales de plántulas de trufa-roble ectomicorrízicas y MAP (lavanda, tomillo y salvia) previamente inoculadas y no inoculadas con hongos micorrízicos arbusculares nativos (AMF), para evaluar las relaciones planta-hongo. Después de 12 meses en un invernadero, se midieron el crecimiento de las plantas, la colonización micorrízica y el micelio extrarradical del suelo (tanto de AMF como de otros). En general, el crecimiento de los robles trufas se vio afectado negativamente por la presencia de MAP, especialmente cuando estaban inoculados con AMF. A su vez, la presencia de robles trufas apenas afectó a las MAP co-cultivadas, y solo las lavandas mostraron una reducción significativa en el crecimiento. Todas las MAP inoculadas con AMF mostraron mayor biomasa de brotes y raíces que las no inoculadas. En comparación con los robles trufas que crecían solos, la presencia de MAP co-cultivadas, especialmente cuando estaban inoculadas con AMF, disminuyó significativamente tanto las ectomicorrizas como el micelio del suelo de AMF. Estos resultados revelan la fuerte competencia entre AMF y los robles trufas y advierten sobre la necesidad de proteger las plantas intercaladas y sus hongos simbióticos asociados para evitar efectos recíprocos contraproducentes en plantaciones mixtas de trufa-roble-AMF-MAP.