PhIP-Seq revela autoanticuerpos para antígenos expresados de manera ubicua en la miocarditis viral
Autores: Rasquinha, Mahima T.; Lasrado, Ninaad; Petro-Turnquist, Erika; Weaver, Eric; Venkataraman, Thiagarajan; Anderson, Daniel; Laserson, Uri; Larman, H. Benjamin; Reddy, Jay
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2022
Acceso abierto
Artículo científico
2022
PhIP-Seq revela autoanticuerpos para antígenos expresados de manera ubicua en la miocarditis viral
Categoría
Ciencias Naturales y Subdisciplinas
Subcategoría
Biología
Palabras clave
Enterovirus
Miocarditis
Autoanticuerpos
PhIP-Seq
CVB3
Miocardiopatía dilatada
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 14
Citaciones: Sin citaciones
Los enterovirus como los coxsackievirus del grupo B (CVB) son comúnmente sospechosos de ser causas de miocarditis que pueden llevar a la miocardiopatía dilatada (DCM), y el modelo de ratón de miocarditis por CVB3 se utiliza rutinariamente para entender la patogénesis de la DCM. Mecanísticamente, se sospecha de la autoinmunidad debido a la presencia de autoanticuerpos para antígenos selectos. Sin embargo, su papel sigue siendo enigmático, lo que también plantea la cuestión de si la amplitud de los autoanticuerpos está suficientemente caracterizada. Aquí, intentamos analizar de manera integral el repertorio de autoanticuerpos utilizando la Secuenciación por Inmunoprecipitación con Fagos (PhIP-Seq), una plataforma versátil y de alto rendimiento, en el modelo de ratón de miocarditis por CVB3. Primero, el análisis de PhIP-Seq utilizando la biblioteca VirScan reveló reactividad de anticuerpos solo hacia CVB3 en el grupo infectado pero no en los controles, validando así la técnica en este modelo. En segundo lugar, utilizando la biblioteca de péptidos de ratón, detectamos autoanticuerpos a 32 péptidos de 25 proteínas en animales infectados que se expresan de manera ubicua y que no se habían reportado previamente. En tercer lugar, al usar ELISA como un ensayo secundario, confirmamos la reactividad de anticuerpos en sueros de animales infectados por CVB3 hacia el factor de ensamblaje de citocromo c oxidasa 4 homólogo (COA4) y la proteína adaptadora de fosfoinositido-3-quinasa 1 (PIK3AP1), indicando la especificidad de la detección de anticuerpos por la tecnología PhIP-Seq. Cuarto, notamos patrones de reactividad de anticuerpos similares en infecciones por CVB3 y CVB4, sugiriendo que los anticuerpos reactivos a COA4 y PIK3AP1 podrían ser comunes a múltiples infecciones por CVB. La especificidad de los autoanticuerpos se confirmó con animales infectados por influenza que no mostraron reactividad a ninguno de los antígenos probados. En conjunto, nuestros datos sugieren que los autoanticuerpos identificados por PhIP-Seq pueden tener relevancia en la patogénesis del CVB, con la posibilidad de que una reactividad similar podría esperarse en pacientes humanos con DCM.
Descripción
Los enterovirus como los coxsackievirus del grupo B (CVB) son comúnmente sospechosos de ser causas de miocarditis que pueden llevar a la miocardiopatía dilatada (DCM), y el modelo de ratón de miocarditis por CVB3 se utiliza rutinariamente para entender la patogénesis de la DCM. Mecanísticamente, se sospecha de la autoinmunidad debido a la presencia de autoanticuerpos para antígenos selectos. Sin embargo, su papel sigue siendo enigmático, lo que también plantea la cuestión de si la amplitud de los autoanticuerpos está suficientemente caracterizada. Aquí, intentamos analizar de manera integral el repertorio de autoanticuerpos utilizando la Secuenciación por Inmunoprecipitación con Fagos (PhIP-Seq), una plataforma versátil y de alto rendimiento, en el modelo de ratón de miocarditis por CVB3. Primero, el análisis de PhIP-Seq utilizando la biblioteca VirScan reveló reactividad de anticuerpos solo hacia CVB3 en el grupo infectado pero no en los controles, validando así la técnica en este modelo. En segundo lugar, utilizando la biblioteca de péptidos de ratón, detectamos autoanticuerpos a 32 péptidos de 25 proteínas en animales infectados que se expresan de manera ubicua y que no se habían reportado previamente. En tercer lugar, al usar ELISA como un ensayo secundario, confirmamos la reactividad de anticuerpos en sueros de animales infectados por CVB3 hacia el factor de ensamblaje de citocromo c oxidasa 4 homólogo (COA4) y la proteína adaptadora de fosfoinositido-3-quinasa 1 (PIK3AP1), indicando la especificidad de la detección de anticuerpos por la tecnología PhIP-Seq. Cuarto, notamos patrones de reactividad de anticuerpos similares en infecciones por CVB3 y CVB4, sugiriendo que los anticuerpos reactivos a COA4 y PIK3AP1 podrían ser comunes a múltiples infecciones por CVB. La especificidad de los autoanticuerpos se confirmó con animales infectados por influenza que no mostraron reactividad a ninguno de los antígenos probados. En conjunto, nuestros datos sugieren que los autoanticuerpos identificados por PhIP-Seq pueden tener relevancia en la patogénesis del CVB, con la posibilidad de que una reactividad similar podría esperarse en pacientes humanos con DCM.