El óxido de zinc (ZnO) daña el medio ambiente y puede aumentar potencialmente el número de bacterias resistentes a los medicamentos. Por lo tanto, existe una necesidad urgente de encontrar alternativas seguras y efectivas para mejorar la salud intestinal y reducir la incidencia de diarrea en lechones destetados. Este estudio realizó una prueba antibacteriana de ZnO, péptidos antibacterianos (AMPs) y ácido tánico (TA) in vitro. Treinta lechones fueron asignados aleatoriamente a uno de los siguientes tres tratamientos dietéticos: ZnO (dieta de ZnO de 2000 mg/kg), AMPs (dieta de AMPs de 700 mg/kg) y TA (dieta de TA de 1000 mg/kg). Los resultados mostraron que las concentraciones mínimas inhibitorias de ZnO y TA eran más bajas que las de AMPs, y las concentraciones mínimas inhibitorias de ZnO, AMPs y TA eran las mismas. En comparación con ZnO, los AMPs aumentaron la digestibilidad de la materia seca, la materia orgánica y la grasa cruda. Además, el TA aumentó significativamente ( < 0.05) la digestibilidad de la materia seca y orgánica. En el día experimental 14, el contenido de interleucina-6 (IL-6) en plasma de los lechones suplementados con AMPs y TA aumentó significativamente ( < 0.05). En el día experimental 28, la actividad de alanina aminotransferasa en el plasma de los lechones destetados en los grupos de ZnO y TA fue significativamente ( < 0.05) mayor que en los lechones del grupo de AMPs. Los niveles de IL-6 en plasma e inmunoglobulina M (IgM) fueron significativamente más altos ( < 0.05) en los grupos de ZnO y AMPs que en el grupo de TA. En los días experimentales 14 y 28, no se observaron diferencias significativas en la capacidad antioxidante entre los tres grupos experimentales. El análisis de la diversidad microbiana intestinal mostró que los índices Chao1 y ACE de los lechones en el grupo de AMPs eran significativamente más altos ( < 0.05) que los de los grupos de ZnO y TA. A nivel de género, la abundancia relativa de fue mayor en las heces de lechones alimentados con una dieta suplementada con TA que en aquellos alimentados con una dieta suplementada con ZnO ( < 0.05). La abundancia relativa de fue mayor en las heces de lechones alimentados con una dieta suplementada con AMPs que en aquellos alimentados con una dieta suplementada con ZnO o TA. En general, los AMPs y el TA podrían añadirse al alimento como sustitutos del ZnO para reducir la diarrea, mejorar la digestibilidad de nutrientes y la inmunidad, y aumentar la abundancia de bacterias intestinales beneficiosas en lechones destetados.