(LSV), (LMoV), (CMV), (SYSV) y (PlAMV) son cinco de los virus económicamente importantes que infectan a los lirios ( spp.) en todo el mundo. Para prevenir la ocurrencia y propagación de estos virus, es necesario desarrollar un método de detección rápido, efectivo y sensible para la detección simultánea y cuantificación específica de estos virus. En este estudio, se utilizaron cebadores y sondas específicos para ensayos de PCR en tiempo real multiplex TaqMan diseñados a partir de regiones conservadas de la secuencia de la proteína de la cápside de cada virus para la detección simultánea de estos virus en lirios ( spp.). La concentración óptima de cebadores y sondas y la temperatura de alineación de la reacción fueron de 20 uM y 55.9 grados C, respectivamente. Los límites de detección del ensayo fueron 1.33 x 10, 1.27 x 10, 1.28 x 10, 2.33 x 10 y 2.01 x 10 copias·L para LSV, LMoV, CMV, SYSV y PlAMV, respectivamente. La especificidad se determinó utilizando siete patógenos virales de lirios. Las pruebas de variabilidad intra e interensayos mostraron una alta reproducibilidad con coeficientes de variación.