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Amplificación de Polimerasa Recombinante Acoplada con Sistema de Detección CRISPR/Cas12a para la Detección Visual Rápida del Circovirus Porcino 3

Autores: Jiang, Genghong; Yang, Xiaoyu; Li, Zhaoyang; Mao, Jingyu; Zeng, Penghui; Wang, Dedong; Wu, Zhi; Liu, Changzhe; Qiu, Yonghui; Cui, Yongqiu; Zhou, Jianwei; Liu, Jue; Hou, Lei

Idioma: Inglés

Editor: MDPI

Año: 2024

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Acceso abierto

Artículo científico
2024

Amplificación de Polimerasa Recombinante Acoplada con Sistema de Detección CRISPR/Cas12a para la Detección Visual Rápida del Circovirus Porcino 3


Categoría

Ciencias Agrícolas y Biológicas

Subcategoría

Zootecnia

Palabras clave

Circovirus porcino tipo 3
PCV3
Métodos de detección visual
CRISPR/Cas12a
Amplificación por polimerasa de recombinasa
Especificidad

Licencia

CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual

Consultas: 6

Citaciones: Sin citaciones


Descripción
La infección por el circovirus porcino tipo 3 (PCV3) es una enfermedad emergente asociada con signos clínicos similares al síndrome de dermatitis y nefropatía porcina (PDNS). Actualmente, no existen vacunas ni terapias efectivas contra esta enfermedad. Por lo tanto, los métodos de detección rápidos, efectivos, sensibles y específicos son cruciales para la identificación, prevención y control oportunos del PCV3. En este estudio, desarrollamos métodos de detección visual de uno y dos frascos para el PCV3 utilizando un sistema de detección de repeticiones palindrómicas cortas agrupadas regularmente interespaciadas (CRISPR)/Cas12a combinado con amplificación por polimerasa de recombinasa (RPA). Estos dos métodos no mostraron reactividad cruzada con ocho otros virus porcinos y exhibieron límites de detección mínimos de cinco y dos copias de ADN viral, respectivamente, revelando su alta especificidad y sensibilidad. Durante la detección de muestras clínicas en 30 minutos, las tasas de coincidencia entre los métodos de detección de uno y dos frascos y la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa en tiempo real (qPCR) fueron del 100%. En conclusión, tanto los métodos de detección RPA-CRISPR/Cas12a de uno como de dos frascos tienen un potencial significativo para la detección visual rápida, sensible y específica del PCV3.

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