PCR en tiempo real multiplex adaptado con controles internos positivos específicos de especie para la detección de SARS-CoV-2 en muestras clínicas de caninos y felinos
Autores: Jeon, Gyu-Tae; Kim, Hye-Ryung; Kim, Jong-Min; Baek, Ji-Su; Shin, Yeun-Kyung; Kwon, Oh-Kyu; Kang, Hae-Eun; Cho, Ho-Seong; Cheon, Doo-Sung; Park, Choi-Kyu
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2023
Acceso abierto
Artículo científico
2023
PCR en tiempo real multiplex adaptado con controles internos positivos específicos de especie para la detección de SARS-CoV-2 en muestras clínicas de caninos y felinos
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Subcategoría
Zootecnia
Palabras clave
Coronavirus
Perros
Gatos
RT-qPCR
SARS-CoV-2
Diagnóstico
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 9
Citaciones: Sin citaciones
Las infecciones por el coronavirus 2 del síndrome respiratorio agudo severo (SARS-CoV-2) se han reportado con frecuencia en perros y gatos de compañía en todo el mundo durante la actual enfermedad por coronavirus. Sin embargo, se han utilizado métodos de RT-qPCR desarrollados para humanos para el diagnóstico de infecciones por SARS-CoV-2 en perros y gatos de compañía sospechosos debido a la falta de métodos adaptados para animales de compañía. Por lo tanto, desarrollamos un RT-qPCR multiplex (mRT-qPCR) utilizando cebadores y sondas diseñados recientemente que apuntan a los genes de todas las variantes de SARS-CoV-2 que circulan actualmente, así como el gen canino o felino como un control positivo interno endógeno (EIPC) para un diagnóstico confiable de la infección por SARS-CoV-2 en perros y gatos sospechosos. El ensayo de mRT-qPCR desarrollado detectó específicamente los genes objetivo de SARS-CoV-2, pero no otros patógenos caninos o felinos. Además, los EIPC caninos y felinos se amplificaron de manera estable mediante mRT-qPCR en muestras que contenían materiales celulares de origen canino o felino. Este ensayo tiene alta repetibilidad y reproducibilidad, con un límite óptimo de detección.
Descripción
Las infecciones por el coronavirus 2 del síndrome respiratorio agudo severo (SARS-CoV-2) se han reportado con frecuencia en perros y gatos de compañía en todo el mundo durante la actual enfermedad por coronavirus. Sin embargo, se han utilizado métodos de RT-qPCR desarrollados para humanos para el diagnóstico de infecciones por SARS-CoV-2 en perros y gatos de compañía sospechosos debido a la falta de métodos adaptados para animales de compañía. Por lo tanto, desarrollamos un RT-qPCR multiplex (mRT-qPCR) utilizando cebadores y sondas diseñados recientemente que apuntan a los genes de todas las variantes de SARS-CoV-2 que circulan actualmente, así como el gen canino o felino como un control positivo interno endógeno (EIPC) para un diagnóstico confiable de la infección por SARS-CoV-2 en perros y gatos sospechosos. El ensayo de mRT-qPCR desarrollado detectó específicamente los genes objetivo de SARS-CoV-2, pero no otros patógenos caninos o felinos. Además, los EIPC caninos y felinos se amplificaron de manera estable mediante mRT-qPCR en muestras que contenían materiales celulares de origen canino o felino. Este ensayo tiene alta repetibilidad y reproducibilidad, con un límite óptimo de detección.