Desarrollo de una Reacción en Cadena de la Polimerasa Anidada con Nuevos Primers Específicos para la Detección de Infección en Ratones de Laboratorio
Autores: Zhang, Hongbo; Zhang, Nan; Li, Jianhua; Zhao, Panpan; Li, Xin; Wang, Xiaocen; Zhang, Xu; Yuan, Bao; Gao, Fei; Gong, Pengtao; Zhang, Xichen
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2023
Acceso abierto
Artículo científico
2023
Desarrollo de una Reacción en Cadena de la Polimerasa Anidada con Nuevos Primers Específicos para la Detección de Infección en Ratones de Laboratorio
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Subcategoría
Zootecnia
Palabras clave
Ceca de roedores
Parasitado
Protozoo flagelado
Metodologías moleculares
Sistema de PCR anidada
Gen del ARNr SSU
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 9
Citaciones: Sin citaciones
Una variedad de cecos de roedores están parasitados por (), un protozoo flagelado. Hasta la fecha, no existen métodos ideales para la detección de infecciones en ratones de laboratorio; por lo tanto, es necesario desarrollar nuevas metodologías moleculares para su detección específica. En este estudio, utilizando tinción y SEM, se observó que tiene un cuerpo en forma de pera y contiene tres flagelos anteriores. Se diseñó un sistema de PCR anidada con nuevos primers específicos basado en las regiones conservadas del gen SSU rRNA de . El sistema de PCR anidada mostró buena especificidad y alta sensibilidad para al menos 100 trofozoítos/mL y 0.1 ng/L de ADN genómico fecal, lo que significa que se podrían detectar 176 trofozoítos por gramo de heces de ratón. Al utilizar este sistema de PCR anidada, la tasa de detección fue del 18.96% (58/306), que fue más alta que la tasa de detección del 14.05% (43/306) detectada a través de microscopía de extendido en muestras fecales de cinco cepas de ratones. Se encontró que la sensibilidad y especificidad de la PCR anidada en la detección de fue del 100%, y demostró un aumento del 26% en la sensibilidad diagnóstica en comparación con el método de microscopía de extendido en el presente estudio. En conclusión, la PCR anidada desarrollada con nuevos primers basados en el gen SSU rRNA de tiene buena precisión, especificidad y sensibilidad para la detección de infecciones en ratones de laboratorio.
Descripción
Una variedad de cecos de roedores están parasitados por (), un protozoo flagelado. Hasta la fecha, no existen métodos ideales para la detección de infecciones en ratones de laboratorio; por lo tanto, es necesario desarrollar nuevas metodologías moleculares para su detección específica. En este estudio, utilizando tinción y SEM, se observó que tiene un cuerpo en forma de pera y contiene tres flagelos anteriores. Se diseñó un sistema de PCR anidada con nuevos primers específicos basado en las regiones conservadas del gen SSU rRNA de . El sistema de PCR anidada mostró buena especificidad y alta sensibilidad para al menos 100 trofozoítos/mL y 0.1 ng/L de ADN genómico fecal, lo que significa que se podrían detectar 176 trofozoítos por gramo de heces de ratón. Al utilizar este sistema de PCR anidada, la tasa de detección fue del 18.96% (58/306), que fue más alta que la tasa de detección del 14.05% (43/306) detectada a través de microscopía de extendido en muestras fecales de cinco cepas de ratones. Se encontró que la sensibilidad y especificidad de la PCR anidada en la detección de fue del 100%, y demostró un aumento del 26% en la sensibilidad diagnóstica en comparación con el método de microscopía de extendido en el presente estudio. En conclusión, la PCR anidada desarrollada con nuevos primers basados en el gen SSU rRNA de tiene buena precisión, especificidad y sensibilidad para la detección de infecciones en ratones de laboratorio.