Estudios previos realizados en peces intermareales (Girella laevifrons), así como en peces marinos (Isacia conceptionis), demostraron que la acetilcolina (ACh) produce contracciones mediadas por ciclooxigenasas que dependen del área y la potencia de contracción en varios vasos arteriales. Dado que la función del óxido nítrico en peces es poco conocida, el objetivo de nuestro estudio fue evaluar su papel en los vasos arteriales aferentes branquiales (ABA), eferentes branquiales (ABE), dorsales (DA) y mesentéricos (MA) de Girella laevifrons e Isacia conceptionis. Se estudiaron las arterias aferentes y eferentes branquiales, dorsales y mesentéricas disecadas de seis ejemplares juveniles. Se realizaron estudios de tensión isométrica utilizando curvas dosis-respuesta (DRC) para Ach (10–13 a 10–3 M) y bloqueo con L-NAME (10–5 M), y DRC para nitroprusiato de sodio (SNP, un donante de NO). L-NAME produjo una atenuación de la respuesta contráctil en las arterias branquiales dorsal, aferente y eferente, y una potenciación de la contracción en la arteria mesentérica (AM). El SNP causó una dilatación del 70 % en la arteria mesentérica y del 40 % en la arteria dorsal. Nuestros resultados sugieren que la Ach promueve una dilatación precaria en la AM mediada por NO; datos respaldados por el uso de nitroprusiato de sodio. Por el contrario, en los vasos DA, ABA y EBA, nuestros resultados respaldan que la vía de relajación Ach-NO está ausente en ambas especies.