Los vasos linfáticos son capaces de sostener la formación y propulsión de linfa a través de un mecanismo intrínseco basado en la contracción espontánea del músculo linfático en la pared de los colectores linfáticos. La exposición a un ambiente hiper- o hipoosmolar puede afectar profundamente la tasa de contracción intrínseca y, por lo tanto, alterar el flujo linfático. En este trabajo, nuestro objetivo fue definir los receptores putativos que subyacen a tal respuesta. Se realizaron experimentos funcionales en especímenes ex vivo de diafragma de rata que contenían vasos linfáticos que contraían espontáneamente y que fueron expuestos a soluciones hiper- o hipoosmolares. Los linfáticos fueron desafiados con bloqueadores de los canales TRPV4, TRPV1 y VRAC, conocidos por responder a cambios en la osmolaridad y/o hinchazón celular y expresados por los vasos linfáticos. Los resultados muestran que la respuesta normal a un ambiente hiperosmolar es una disminución constante en la tasa de contracción y el flujo linfático, y puede ser prevenido bloqueando los canales TRPV1 con capsazepina. La respuesta a un ambiente hipoosmolar consiste en una fase temprana de aumento en la tasa de contracción, seguida de una disminución. La fase temprana se anula bloqueando los VRAC con DCPIB, mientras que el bloqueo de TRPV4 resultó principalmente en un retraso de la respuesta temprana. En general, nuestros datos sugieren que la cooperación de los tres canales puede moldear la respuesta de los vasos linfáticos en términos de frecuencia de contracción y flujo linfático, con un papel destacado de TRPV1 y VRAC.