La dominancia apical y la heterogeneidad del cultivo limitan significativamente la eficiencia de la micropropagación del olivo, obstaculizando la producción rápida de plantones. Este estudio explora cómo la manipulación del origen del explante (topofisis) y la densidad pueden mitigar estos desafíos. Los explantes provenientes de secciones apicales y medias se cultivaron a densidades de 18, 24 y 30 explantes por recipiente. Después de 12 semanas, se observaron diferencias significativas en los parámetros de crecimiento según el origen del explante y la densidad. Los explantes de la sección media mostraron una proliferación de brotes y producción de nudos superiores, especialmente a densidades más altas. El peso del callo también aumentó con la densidad, mientras que la longitud del internudo se mantuvo relativamente estable. El análisis hormonal demostró el patrón de distribución espacial dependiente de la densidad de las citoquininas aromáticas e isoprenoides. Notablemente, a densidades más altas, las bases libres aromáticas en las hojas de la sección apical mostraron migración hacia los ápices de los brotes, mientras que esta migración fue menos pronunciada en las hojas de la sección media. Las citoquininas isoprenoides mostraron patrones de distribución complejos, con bases libres y O-glucosidos que a menudo aumentaban hacia los nudos basales. Estos hallazgos demuestran que la optimización del origen del explante y la densidad puede reducir efectivamente la dominancia apical y mejorar la homogeneidad del cultivo en la micropropagación del olivo. Este enfoque ofrece una estrategia prometedora para mejorar los protocolos de micropropagación del olivo y potencialmente de otras plantas leñosas, lo que conduce a una producción más eficiente y rentable de plantones de alta calidad para uso comercial.