Los sustratos profesionales libres de turba para la producción de plantas ornamentales son cada vez más requeridos por los productores de viveros. Los materiales más prometedores son el compost verde, el polvo de fibra de coco y la fibra leñosa, utilizados solos o en mezclas. Una de las principales preocupaciones es el pH, que suele ser más alto de lo óptimo. En este trabajo, se adoptó un método basado en un procedimiento de tres pasos para acidificar tres matrices orgánicas solas o en mezclas y para identificar el producto más adecuado, entre el sulfato de hierro(II) 7-hidratado y las virutas de azufre elemental. En primer lugar, se llevó a cabo la determinación de la capacidad de amortiguación mediante la dilución con ácido sulfúrico para determinar las dosis. Posteriormente, se realizó un ensayo de incubación de 84 días (sulfato de hierro) o 120 días (virutas de azufre) en las matrices y mezclas de sustrato con dosis calculadas en una cámara climática mantenida a 21 grados Celsius. El sulfato de hierro resultó no ser adecuado porque causó una acidificación rápida, pero no duradera, del pH y un aumento excesivo de la conductividad eléctrica (CE). En cambio, las virutas de azufre podrían garantizar una disminución adecuada y duradera del pH. Estos resultados fueron luego validados en el ensayo de campo abierto en matrices y sustratos. La metodología de acidificación propuesta podría considerarse en el desarrollo de nuevos sustratos, pero la rapidez de la acidificación del pH y el aumento de la CE en la nutrición de las plantas y los minerales deberían investigarse más a fondo.