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Perfilado del Rendimiento de Transgenes Humanos Ayuda en la Selección de Especímenes y Tejidos Más Adecuados para la Xenotransplantación de Órganos de Cerdo

Autores: Martínez-Alarcón, Laura; Liarte, Sergio; Quereda, Juan J.; Sáez-Acosta, Aida; Torre-Minguela, Carlos de; Mendonça, Livia; Abellaneda, Juana M.; Majado, María J.; Ríos, Antonio; Ramírez, Pablo; Muñoz, Antonio; Ramis, Guillermo

Idioma: Inglés

Editor: MDPI

Año: 2021

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Acceso abierto

Artículo científico
2021

Perfilado del Rendimiento de Transgenes Humanos Ayuda en la Selección de Especímenes y Tejidos Más Adecuados para la Xenotransplantación de Órganos de Cerdo


Categoría

Ciencias Naturales y Subdisciplinas

Subcategoría

Biología

Palabras clave

Xenotrasplante
órganos de cerdo
Rechazo hiperagudo
Transgénesis
Proteínas reguladoras del complemento humano
Factor acelerador de la degradación

Licencia

CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual

Consultas: 17

Citaciones: Sin citaciones


Descripción
La xenotransplantación de órganos de cerdo recibe una atención sustancial por ser comparable a los humanos. Sin embargo, las limitaciones de compatibilidad relacionadas con el rechazo hiperagudo (HAR) aún bloquean las aplicaciones clínicas. Se ha propuesto la transgénesis de proteínas reguladoras del complemento humano para superar la xenorrechazo. Los cerdos que expresan proteínas humanas han sido ampliamente probados en cirugía experimental. Aún así, no se ha desarrollado un método estandarizado para determinar la expresión de tejido del factor de aceleración de decaimiento humano (DAF), producto, o para predecir la capacidad de superar el HAR. Aquí describimos procedimientos objetivos que abordan esta necesidad. Se recolectaron y clasificaron órganos y tejidos de cinco cerdos transgénicos según su valor para la xenotransplantación. La capacidad de superar el HAR se evaluó mediante ensayos de hemólisis de la vía clásica del complemento. Se realizaron estudios de expresión de ARNm mediante PCR cuantitativa y niveles de proteínas mediante Western blot. Los ensayos de citotoxicidad en tiempo real (RTCA) en cultivos de fibroblastos expuestos a sueros de babuinos y humanos informaron sobre la dinámica de rechazo a largo plazo. Si bien una mayor expresión de DAF se correlacionó con un mejor rendimiento, los resultados obtenidos variaron entre los especímenes. Curiosamente, el individuo con los niveles más altos de ARNm y proteínas mostró retroalimentación positiva para el transcripto después del desafío con sueros humanos y de babuino. Además, la expresión se correlacionó con los niveles de DAF en el hígado, los pulmones y el intestino, pero no en el corazón. Además, encontramos correlaciones significativas entre tejidos valiosos y no valiosos. En resumen, la metodología propuesta nos permite caracterizar el funcionamiento y rendimiento del transgen. Además, las correlaciones encontradas podrían permitirnos predecir la expresión de DAF en tejidos sustitutos, eliminando así la necesidad de biopsias directas, lo que resulta en la preservación de la integridad del órgano antes de la xenotransplantación.

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