El glioblastoma (GBM) es un cáncer cerebral primario letal con una tasa de supervivencia a cinco años del 5,6%. Los campos de tratamiento de tumores (TTFields) son campos eléctricos de baja intensidad alternantes que han demostrado un beneficio de supervivencia para pacientes con GBM. Anteriormente informamos que la exposición a TTFields de 0,5-24 h resultó en un aumento en la captación de sondas fluorescentes de FITC-dextrano (4-20 kDa) en células humanas de GBM. Sin embargo, este enfoque, en el cual se utiliza un detector de placas de fluorescencia para evaluar células adheridas a cubreobjetos de vidrio, no puede distinguir la captación de FITC-dextrano en células vivas vs. muertas. El objetivo del estudio fue informar sobre la optimización y validación de dos métodos independientes para cuantificar la permeabilización de la membrana celular de células humanas de GBM inducida por la exposición a TTFields. En primer lugar, optimizamos la citometría de flujo midiendo la intensidad media de fluorescencia a las 72 h para sondas de 4 kDa (TTFields 6726 +/- 958,0 vs. no-TTFields 5093 +/- 239,7, = 0,016) y 20 kDa (7087 +/- 1137 vs. 5055 +/- 897,8, = 0,031). En segundo lugar, medimos la relación de la deshidrogenasa láctica (LDH) a la viabilidad celular (medida utilizando el ensayo de viabilidad CellTiter-Glo [CTG]); la relación LDH/CTG fue mayor bajo condiciones de TTFields (1,47 +/- 0,15) que bajo condiciones sin TTFields (1,08 +/- 0,08), < 0,0001. Los hallazgos utilizando estos dos métodos independientes demostraron de manera reproducible su utilidad para evaluaciones dependientes del tiempo. También demostramos que estos métodos pueden ser utilizados para relacionar los efectos de permeabilización de la membrana celular de los TTFields, radiación no ionizante, con los de un permeabilizador de membrana celular establecido, el detergente no iónico Triton-X-100. Al evaluar carboplatino +/- TTFields, la relación LDH/CTG fue significativamente mayor en la condición con TTFields en comparación con la condición sin TTFields en cada concentración de carboplatino (0-30 uM), 0,014. Hemos optimizado y validado con éxito dos métodos rentables para cuantificar de manera reproducible la permeabilización de la membrana celular de células cancerosas de GBM inducida por TTFields.