El pino de cordero (masson) es una especie crítica para la reforestación en el sur de China, pero enfrenta graves amenazas por la enfermedad del marchitamiento del pino (PWD) causada por. Para acelerar la cría resistente a enfermedades, este estudio investigó los efectos de la criopreservación en la capacidad embrionaria del callo embriogénico, así como los efectos de la concentración de ácido abscísico (ABA), polietileno glicol 8000 (PEG 8000) y fitagel en la maduración y germinación del embrión somático. Además, se evaluó el impacto de los sustratos de trasplante en la supervivencia y el crecimiento de plántulas regeneradas. Los resultados mostraron que la criopreservación a -196 grados C mantuvo efectivamente el potencial embriogénico del callo, con tejidos post-descongelados que exhibieron una capacidad de maduración de embrión somático superior en comparación con el callo subcultivado a largo plazo (38.4 vs. 13.2 embriones/mL). Se optimizaron sistemáticamente los parámetros clave de maduración: la concentración de ABA a 6 mg/L en el cultivo en suspensión maximizó el rendimiento de embriones a 24.1 embriones somáticos/mL, mientras que el PEG 8000 a 130 g/L en medio sólido logró una producción máxima de embriones de 38.4 embriones somáticos/mL, y el máximo de 26.6 embriones somáticos/mL cuando la concentración de fitagel fue de 3.5 g/L. La tasa de germinación más alta de 29.8% se observó con 130 g/L de PEG en el medio de maduración. La tasa de supervivencia más alta (56.5%) y la altura máxima de planta (22.3 cm) después de 12 meses de trasplante se lograron en sustratos compuestos de suelo y vermiculita, que superaron a aquellos que contenían diferentes proporciones de residuo de champiñón. Este estudio establece un protocolo escalable para la propagación masiva de PWD-resistente, integrando la criopreservación y la optimización de medios de maduración, lo que ofrece beneficios duales para la cría resistente a enfermedades y la conservación sostenible de germoplasma.