Numerosos protocolos han sido publicados para extraer ADN de flebotominos. Sin embargo, su pequeño tamaño suele ser un problema en cuanto a rendimiento, eficiencia y pureza, para extracciones de ADN de moscas de arena a gran escala cuando se utilizan métodos tradicionales. Aunque esto se puede evitar con kits comerciales, estos suelen ser prohibitivos en costos para países en desarrollo. Encontramos estas limitaciones al analizar spp. recolectadas en el campo mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y, por esta razón, evaluamos varias modificaciones en un protocolo previamente publicado, siendo la más significativa un tampón de lisis diferente que contenía Ca (tampón TESCa). Este ion protege a la proteinasa K contra la autólisis, aumenta su estabilidad térmica y podría tener una función reguladora en su sitio de unión al sustrato. El éxito en la extracción de ADN de moscas de arena individuales fue confirmado mediante reacciones de amplificación utilizando cebadores de control interno que amplifican un fragmento del gen. Hasta donde sabemos, esta es la primera vez que se informa sobre un tampón de lisis que contiene Ca para la extracción de ADN de moscas de arena.