Los inhibidores de serina proteasa se encuentran en plantas, animales y microorganismos, donde desempeñan roles importantes en muchos procesos fisiológicos y patológicos. Los andamios de inhibidores basados en proteínas y péptidos naturales se han convertido gradualmente en el foco de la investigación actual, ya que tienden a unirse a sus objetivos con mayor especificidad que las pequeñas moléculas. En este informe, se describe un nuevo inhibidor tipo Bowman-Birk, llamado ranaciclina-NF (RNF), que fue identificado en la secreción cutánea de la rana del Este Asiático. Un replicado sintético del péptido fue sometido a una serie de ensayos funcionales. Mostró actividad inhibidora de tripsina con una constante inhibitoria, Ki, de 447 nM y tuvo una citotoxicidad directa negligible. No se encontró actividad antimicrobiana directa observable, pero RNF mejoró la potencia terapéutica de la Gentamicina contra Staphylococcus aureus resistente a meticilina (MRSA). RNF compartió una similitud de secuencia significativa con inhibidores relacionados previamente reportados de (ORB) y (ranaciclina-T), ambos los cuales se encontraron que eran multifuncionales. Se diseñaron dos análogos de RNF, llamados ranaciclina-NF1 (RNF1) y ranaciclina-NF3L (RNF3L), basados en algunas características de ORB y ranaciclina-T para estudiar las relaciones estructura-actividad. Los estudios de estructura-actividad demostraron que los residuos fuera del bucle inhibidor de tripsina (TIL) pueden estar relacionados con la eficacia de la actividad inhibidora de tripsina.