La capacidad de la adormidera para producir varios alcaloides es tanto útil como problemática. Por lo tanto, la cría de nuevas variedades con diferentes contenidos de alcaloides es una tarea importante. En este documento, se presenta la tecnología de cría de nuevos genotipos de adormidera con bajo contenido de morfina, basada en una combinación de un enfoque TILLING y secuenciación NGS en tiempo real de molécula única. La verificación de los mutantes en la población TILLING se obtuvo utilizando métodos de RT-PCR y HPLC. Solo se utilizaron tres de los genes de copia única de la vía de la morfina entre los once genes para la identificación de genotipos mutantes. Se obtuvieron mutaciones puntuales solo en un gen, mientras que se obtuvo una inserción en el otro. Solo se obtuvieron algunos SNPs de transición esperados de G:C a A:T. En el genotipo mutante de baja morfina, la producción de morfina se redujo al 0.1% desde el 1.4% en la variedad original. Se proporciona una descripción completa del proceso de cría, una caracterización básica del contenido principal de alcaloides y un perfil de expresión génica para los principales genes productores de alcaloides. También se describen y discuten las dificultades con el enfoque TILLING.