El virus de la hepatitis E zoonótica genotipo 3 (HEV-3) causa la mayoría de los casos autóctonos de hepatitis E humana en Europa, que se deben al consumo de productos alimenticios de origen animal crudos o poco cocidos. Los cerdos y jabalíes se consideran los principales reservorios de este genotipo, mientras que los conejos son el reservorio de un grupo filogenético distinto llamado HEV-3ra, que se clasifica dentro del genotipo HEV-3 pero en un clado separado. Se sugirió evidencia del potencial zoonótico de HEV-3ra por su detección en pacientes inmunocomprometidos en varios países europeos. Se encontró infección por HEV-3ra en poblaciones de conejos de granja y salvajes en todo el mundo y se informó de su circulación en algunos países europeos, incluido Italia. Además, Italia es uno de los principales productores y consumidores de carne de conejo en Europa, pero solo unos pocos estudios han investigado la presencia de HEV en este reservorio. El objetivo de este estudio fue evaluar la presencia de HEV en 328 liebres italianas y 59 conejos de granja recolectados en 3 macroáreas italianas (Norte, Norte-Centro y Sur-Centro), entre 2019 y 2021. Para este propósito, se utilizaron muestras de hígado para detectar ARN de HEV utilizando RT-PCR en tiempo real de amplio espectro y RT-PCR anidada. Usando 28 trasudados hepáticos de liebres, también se realizó la prueba ELISA para la detección de anticuerpos anti-HEV IgG. No se detectaron ni ARN de HEV ni anticuerpos anti-HEV. Se llevarán a cabo más estudios para evaluar la presencia de HEV en los lagomorfos italianos para establecer el papel de este hospedador y el posible riesgo de transmisión para los trabajadores con exposición ocupacional, para los dueños de mascotas y a través de los alimentos.