(1) Antecedentes: Los heterótrofos pueden afectar la biomasa de las plantas y alterar las relaciones entre la diversidad de especies y la productividad. Sin embargo, estos estudios se realizaron en sistemas con baja disponibilidad de nitrógeno (N), y no está claro cómo la eliminación de heterótrofos afecta la relación entre la diversidad de especies de plantas y la productividad en diferentes hábitats de N. (2) Métodos: Se seleccionaron tres plantas herbáceas típicas del sotobosque para ensamblar la diversidad de especies de plantas (tres niveles de riqueza de especies de plantas (1, 2 y 3) y siete composiciones de especies de plantas), y se realizaron los tratamientos de control, insecticida, fungicida y todas las eliminaciones en cada nivel de diversidad de especies de plantas en sistemas con o sin tratamientos de adición de N. (3) Resultados: En sistemas sin adición de N, el tratamiento con insecticida aumentó la biomasa aérea de las plantas, la biomasa total y el área foliar, mientras que el tratamiento con fungicida redujo la biomasa subterránea de las plantas, la longitud de las raíces y el número de puntas de raíces; la presencia de aumentó la biomasa aérea de las plantas. De manera similar, la presencia de aumentó la biomasa subterránea de las plantas y el diámetro de las raíces bajo cada tratamiento de eliminación de heterótrofos. En sistemas con adición de N, todos los tratamientos de eliminación redujeron la biomasa subterránea de las plantas y aumentaron el área foliar de las plantas; la presencia de aumentó significativamente la biomasa aérea de las plantas, la biomasa total y la longitud de las raíces bajo cada tratamiento de eliminación de heterótrofos. La presencia de aumentó significativamente la biomasa subterránea de las plantas y el área foliar bajo los tratamientos de insecticida y fungicida. (4) Conclusiones: La eliminación de heterótrofos altera la relación entre la diversidad de especies de plantas y la biomasa al afectar los rasgos funcionales de las plantas en sistemas con diferentes disponibilidades de N. El impacto de la biodiversidad en diferentes niveles tróficos sobre el funcionamiento del ecosistema debe ser considerado en el contexto del cambio global.