(PVY) causa graves pérdidas en el rendimiento y la calidad de las papas. Se estudió el efecto de nanopartículas de quitosano (CS-NPs) en la respuesta de regeneración y producción de plantas libres de PVY bajo condiciones in vitro. El medio de Murashige y Skoog (MS) suplementado con 0.1 mg L de ácido giberélico (GA), 0.1 mg L de ácido naftalenacético (NAA) y 500 mg L de extracto de malta se utilizó para la regeneración de plántulas a partir de brotes. Se utilizó el Ensayo de Inmunoabsorción Enzimática de Sandwich de Doble Anticuerpo (DAS-ELISA) y la Reacción en Cadena de la Polimerasa de Transcriptasa Inversa (RT-PCR) para la indexación del virus de la planta madre y de las plántulas regeneradas in vitro. Los explantes de plantas de papa positivas para PVY se cultivaron en el mismo medio modificado con 100, 200, 250 y 300 mg L de (CS-NPs). La regeneración de brotes disminuyó de 100 a 200 mg L a medida que aumentaban las concentraciones de antiviral (CS-NPs) hasta 250 mg L. Disminuyó con el aumento de la concentración del antiviral (CS-NPs) hasta 300 mg L. El antiviral (CS-NPs) en una concentración de 250 mg L mostró un efecto positivo en la regeneración de brotes. Las plántulas regeneradas in vitro estaban libres de virus y dieron negativo tanto en ELISA como en RT-PCR. El nivel de 100 mg L de (CS-NPs) produjo un 38.8% de plantas libres de PVY y el 30.50% de los cultivos mostraron regeneración de brotes. El nivel de 200 mg L de (CS-NPs) produjo un 49.6% de plantas libres de PVY mientras que el 46.8% de los cultivos mostraron regeneración de brotes. El nivel de 250 mg L de (CS-NPs) fue el más efectivo y produjo un 100.0% de plantas libres de PVY y el 100.0% de los cultivos mostraron regeneración de brotes. Los cambios histopatológicos simultáneos con la elucidación de la resistencia y el aumento del crecimiento fueron evidentes en las plantas tratadas con (CS-NPs) en comparación con las no tratadas. En conclusión, el tratamiento con (CS-NPs) es una herramienta efectiva para producir explantes de brotes libres de PVY y tiene potencial para producir material de siembra libre de virus para la industria de la papa.