El virus del mosaico del tabaco (TMV) es un patógeno importante que afecta a las plantas de tomate en todo el mundo. Se investigó la eficacia de los nanopartículas de plata (Ag-NPs) mediadas por extracto de cáscara de bioperdida para mitigar el impacto negativo de la infección por TMV en el crecimiento del tomate y el estrés oxidativo a través de microscopía electrónica de barrido (SEM), microscopía electrónica de transmisión (TEM), espectrofotómetro UV-Visible (UV-Vis), difracción de rayos X (XRD), dispersión de luz dinámica (DLS), potencial zeta, espectroscopía de rayos X dispersiva de energía (EDX) y espectros de infrarrojo por transformada de Fourier (FTIR). Los resultados del análisis SEM de las Ag-NPs verdes revelaron la presencia de NPs esféricos o redondeados condensados con diámetros que oscilan entre 61 y 97 nm. TEM confirmó los resultados de SEM y mostró Ag-NPs de forma redonda con un tamaño promedio de 33.37 +/- 12.7 nm. El análisis elemental (EDX) de las Ag-NPs preparadas reveló la presencia de Ag elemental como un pico principal (64.43%) a 3-3.5 KeV. El FTIR reveló varios grupos funcionales en las Ag-NPs preparadas, para las cuales se evaluaron tres estrategias de tratamiento para aplicaciones de Ag-NP en el estudio en invernadero y se compararon con plantas inoculadas con TMV y plantas de control: tratamiento pre-infección (TB), tratamiento post-infección (TA) y tratamiento dual (TD). Los resultados mostraron que la estrategia TD es la más efectiva para mejorar el crecimiento del tomate y reducir la replicación viral, mientras que todos los tratamientos con Ag-NP (TB, TA y TD) aumentaron significativamente la expresión de los genes relacionados con la patogénesis (PR) PR-1 y PR-2, así como compuestos polifenólicos, HQT y genes C4H en comparación con las plantas de control. En contraste, el contenido de flavonoides de las plantas de tomate no se vio afectado por la infección viral, mientras que el contenido fenólico se redujo significativamente en el grupo TMV. Además, la infección por TMV provocó un aumento significativo en los marcadores de estrés oxidativo MDA y HO, así como una reducción en la actividad enzimática de los antioxidantes PPO, SOD y POX. Nuestros resultados mostraron claramente que la aplicación de Ag-NPs en plantas infectadas por TMV reduce la acumulación del virus, retrasa la replicación viral en todos los tratamientos y mejora en gran medida la expresión del gen CHS involucrado en la biosíntesis de flavonoides. En general, estos hallazgos sugieren que el tratamiento con Ag-NPs puede ser una estrategia efectiva para mitigar el impacto negativo de la infección por TMV en las plantas de tomate.