El aumento de la resistencia a los antibióticos se ha convertido en una amenaza importante para la salud humana y se está propagando a nivel mundial. Puede hacer que las enfermedades infecciosas comunes sean difíciles de tratar y conduce a mayores costos médicos y a un aumento de la mortalidad. Por lo tanto, las nanofibras poliméricas multifuncionales con estructuras distintivas y propiedades fisicoquímicas únicas han surgido como una nueva herramienta para atacar los biofilms y superar infecciones bacterianas mortales. Esta revisión enfatiza los criterios de diseño y las propiedades de las nanofibras electrohiladas que pueden ser utilizadas para mejorar su actividad terapéutica en la terapia antimicrobiana. Además, presentamos avances recientes en el diseño de la funcionalización superficial de nanofibras antimicrobianas con agentes no antibióticos para una terapia antibacteriana efectiva. Por último, discutimos las tendencias futuras y los desafíos restantes para las nanofibras poliméricas.