Los sobrevivientes masculinos de cáncer infantil han sido conocidos por sufrir de azoospermia. Para combatir esto, la aislamiento y purificación de células madre espermatogoniales (SSCs) son cruciales. Implementar andamios que emulen el entorno de la matriz extracelular es vital para promover la regeneración y proliferación de las SSCs. Esta investigación tuvo como objetivo evaluar la eficiencia de andamios nanocompuestos basados en alginato, quitosano y óxido de grafeno (GO) en facilitar la proliferación de las SSCs. Para analizar la citotoxicidad de los andamios, se realizó un ensayo MTT a 1, 3 y 7 días, y la muestra que contenía 30 ug/mL de GO (ALGCS/GO30) mostró los resultados más favorables, indicando su rendimiento óptimo. La identidad de las células fue confirmada mediante citometría de flujo con marcadores. Los andamios fueron sometidos a varios análisis para caracterizar sus propiedades. Se empleó FTIR para evaluar la estructura química, XRD para examinar la cristalinidad y SEM para visualizar la morfología de los andamios. Para evaluar la proliferación de las SSCs, se utilizó qRT-PCR. Los resultados del estudio demostraron que el andamio nanocompuesto ALGCS/GO30 exhibió biocompatibilidad y facilitó la adhesión y proliferación de las SSCs. Notablemente, el andamio mostró un aumento significativo en los marcadores de proliferación en comparación con el grupo de control, indicando su capacidad para apoyar el crecimiento de las SSCs. El nivel de expresión de la proteína fue evaluado utilizando el método de Inmunocitoquímica. Las observaciones confirmaron los resultados de qRT-PCR, que indicaron que los andamios nanocompuestos tenían niveles más altos de expresión de proteínas que los andamios sin GO. El biocompatible ALGCS/GO30 es una alternativa prometedora para promover la proliferación de SSCs en aplicaciones in vitro.