La pérdida de la integridad de la membrana lisosomal resulta en la fuga de hidrolasas lisosomales al citosol, lo que podría dañar la función celular e inducir la muerte celular. La desestabilización de los lisosomas a menudo precede a la muerte celular apoptótica o necrótica y ocurre durante condiciones fisiológicas y patológicas. El colorante vital naranja de acridina, una base débil, entra fácilmente en las células y se acumula en el entorno ácido de los lisosomas. El tinción vital con naranja de acridina es una técnica bien probada para observar la desestabilización lisosomal utilizando microscopía de fluorescencia y citometría de flujo. Sin embargo, estos análisis son laboriosos y solo se adaptan para puntos de tiempo discretos, lo que los hace inadecuados para enfoques a gran escala. Por lo tanto, hemos desarrollado un método basado en lectores de microplacas de alta capacidad que ahorra tiempo para seguir la desestabilización de la membrana lisosomal en tiempo real utilizando naranja de acridina. Este protocolo puede ser fácilmente adoptado para muestras de pacientes, ya que el número de células por muestra es bajo y el tiempo de análisis es corto.