Las infecciones pleurales bacterianas están asociadas con una alta mortalidad. El tratamiento es complicado debido a la formación de biopelículas. Un patógeno causante común es (). Dado que es específico del ser humano, los modelos de roedores no proporcionan condiciones adecuadas para la investigación. El propósito de este estudio fue examinar los efectos de la infección en células mesoteliales pleurales humanas utilizando un modelo de cocultivo 3D organotípico de pleura derivado de especímenes humanos recientemente establecido. Después de la infección de nuestro modelo con , se recolectaron muestras en puntos de tiempo definidos. Se realizaron análisis histológicos e inmunotinciones de proteínas de unión estrecha (c-Jun, VE-cadherina y ZO-1), demostrando cambios comparables a un empiema in vivo. La medición de niveles de citoquinas secretadas (TNF-alfa, MCP-1 e IL-1beta) demostró interacciones huésped-patógeno en nuestro modelo. De manera similar, las células mesoteliales produjeron VEGF en niveles in vivo. Estos hallazgos fueron contrastados por células vitales e intactas en un modelo de control estéril. Logramos establecer un modelo de cocultivo 3D organotípico in vitro de pleura humana infectada con , lo que resultó en la formación de biopelículas, incluidas interacciones huésped-patógeno. Este nuevo modelo podría ser una herramienta microambiental útil para estudios in vitro sobre biopelículas en empiema pleural.