Los miARN son críticos para la esteroidogénesis en las células de la granulosa (CGs) durante el desarrollo folicular ovárico. Hemos demostrado anteriormente que el miR-202-5p muestra un patrón de expresión dependiente de la etapa en las CGs de folículos de ganso de diferentes tamaños, lo que sugiere que este miARN podría estar involucrado en la regulación de las funciones de las CGs de ganso; por lo tanto, en este estudio, se evaluaron los efectos del miR-202-5p en el metabolismo lipídico y la esteroidogénesis en las CGs foliculares jerárquicas de ganso (hCGs), así como sus mecanismos de acción. La tinción con Oil Red O y los análisis de los contenidos intracelulares de colesterol y triglicéridos mostraron que la sobreexpresión de miR-202-5p inhibió significativamente la deposición lipídica en las hCGs; además, el miR-202-5p inhibió significativamente la secreción de progesterona en las hCGs. Un análisis bioinformático y un ensayo de reportero de luciferasa indicaron que la acil-CoA sintasa miembro de la familia de cadena larga 3, que activa ácidos grasos de cadena larga para la síntesis de lípidos celulares, es un objetivo potencial del miR-202-5p. El silenciamiento de ACSL3 inhibió la deposición lipídica y la secreción de estrógenos en las hCGs. Estos datos sugieren que el miR-202-5p ejerce efectos inhibitorios sobre la deposición lipídica y la esteroidogénesis en las hCGs de ganso al dirigirse al gen.