El estrés térmico (ET) se ha convertido en uno de los principales desafíos que enfrenta la industria láctea debido al calentamiento global. Estudios han informado que el miR-196a puede ejercer un papel en la respuesta del organismo al ET, mejorando la proliferación celular y mitigando el estrés celular. Sin embargo, su papel específico en las células epiteliales mamarias bovinas (CEMB) aún debe ser elucidado. En este estudio, nuestro objetivo fue investigar si el miR-196a podría proteger a las CEMB contra el arresto de proliferación inducido por el ET y explorar su posible mecanismo subyacente. En esta investigación, desarrollamos un modelo de ET para las CEMB y observamos una supresión significativa de la proliferación celular, así como una disminución significativa en la expresión de miR-196a cuando las CEMB fueron expuestas al ET. Importante, cuando se sobreexpresó el miR-196a, se alivió el efecto inhibitorio del ET sobre la proliferación celular. Realizamos secuenciación de ARN y identificamos 105 genes expresados diferencialmente (GED). Algunos de estos GED estaban asociados con vías relacionadas con la termogénesis y la proliferación. A través de RT-qPCR, Western blotting y ensayos de reportero de luciferasa dual, identificamos como un gen objetivo del miR-196a. En resumen, nuestros hallazgos destacan que el miR-196a puede promover la proliferación de las CEMB al inhibir y sugieren que el eje miR-196a/CDKN1B puede ser una vía potencial por la cual el miR-196a alivia el arresto de proliferación inducido por el estrés térmico en las CEMB.