El sistema CRISPR/Cas12f tipo V, con su amplio rango de reconocimiento de PAM, pequeño tamaño y facilidad de entrega, ha contribuido significativamente a la caja de herramientas de edición genética. En este estudio, se detectó la actividad de enOsCas12f1 durante la expresión transitoria en protoplastos de arroz. Los resultados mostraron que enOsCas12f1 exhibió actividad de escisión de ADN cuando reconoció PAMs TTN. Posteriormente, examinamos la eficiencia de edición genética de enOsCas12f1 en plantas de arroz transformadas de manera estable, y los resultados mostraron que enOsCas12f1 pudo identificar las secuencias de PAM TTT y TTC del gen, lo que resultó en mutaciones genéticas y un fenotipo albino. Las eficiencias de edición de los PAM TTT y TTC fueron del 6.21% y 44.21%, respectivamente. Además, todas las mutaciones fueron eliminaciones de bases, con un tamaño que varió de 7 a 29 pares de bases. Luego, utilizamos enOsCas12f1 para editar el promotor y el 5 UTR del gen, demostrando que enOsCas12f1 podría producir de manera estable plantas de arroz mutantes con eliminación de bases. Adicionalmente, fusionamos el dominio de activación transcripcional TV con el enOsCas12f1 muerto para mejorar la expresión del gen objetivo. Nuestro estudio demuestra que enOsCas12f1 puede ser utilizado para la modificación genética del arroz, ampliando así la caja de herramientas para la edición genética del arroz.